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将磁性可再生性固定化酶应用于微波辅助蛋白酶解。包覆了 SiO2 的 Fe3O4 磁性粒子(Fe3O4@ mSiO2)表面经 3-(2,3-环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷偶联剂(GLYMO)与亚氨基二乙酸(IDA)反应的产物 (GLYMO-IDA)修饰,加入 Cu2+形成金属螯合配体后利用 Cu2+与木瓜蛋白酶作用固定木瓜蛋白酶。在优化条件下,获得的固定化酶酶活为 1158.8U,酶活保留率达 44.1%。所获得的固定化木瓜蛋白酶具有易再生、再生后酶活稳定的特点。再生5次后酶活平均值为 1014U,再生率达 88%。HPLC分析表明,微波辅助结合固定化可再生酶可用于黑蚂蚁蛋白的快速酶解,获得的色谱图轮廓与自由酶酶解结果相似。酶解过程快,多肽丰富且易与底物分离,表明可再生固定化酶结合微波辅助有助于蛋白的酶解与多肽的制备。 相似文献
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以Fe3O4@mSiO2@nSiO2介孔材料为载体,γ-氨丙基三乙氧基硅烷接枝,戊二醛交联,研究胰蛋白酶的固定化及其在蛋白酶解中的应用。对蛋白酶固定化条件的优化研究表明,φ(戊二醛)=1.875%、给酶量为0.3 mg/mL、反应时间为4 h时酶的固定化效率可达50.5%,且保持77.3%相同含量酶的活性。对牛血清蛋白的酶解实验表明,在微波辅助作用下,磁性微球材料固定化酶可快速高效地酶解牛血清蛋白,酶解液在λ=280 nm处有较明显的吸收信号变化,HPLC分析表明酶解液中多肽片段吸收值变化明显,同时有新的多肽片段生成。 相似文献
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烟草系统素多肽是烟叶植物中系统性防御反应的信号分子,调控烟草的生长、发育和防御等整个生命周期活动。本工作采用液相色谱 线性离子阱质谱(LC-LTQ-MS)联用技术,研究3种烟草系统素多肽的质谱裂解规律。结果表明:烟草系统素多肽的准分子离子均带3~4个电荷;多肽准分子离子峰在18~25 V的碰撞电压下,主要产生b型和y型碎片离子;在离子化过程中,烟草系统素Ⅱ(TobSys Ⅱ)最强准分子离子[M+4H]4+的最优碰撞电压为20 V;烟草系统素Ⅰ(TobSys Ⅰ)和烟草系统素Ⅲ(TobSys Ⅲ)最强准分子离子峰[M+3H]3+的最优碰撞电压为22 V;在最优碰撞电压下,烟草系统素多肽的离子碎片信息丰富,特征离子碎片的峰强度最大,且主要在亮氨酸、羟脯氨酸和脯氨酸的氨基端进行断裂。该质谱裂解规律可为检测植物样品中的系统素提供科学依据。 相似文献
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白腐菌降解木质纤维素顺序规律的研究 总被引:19,自引:0,他引:19
通过纤维素、半纤维素和木质素三者含量变化的测定,以及傅立叶变换红外光谱(FTIR)的谱图分析,研究了 BP2、CD1和 AX3三株白腐菌在50 天培养期中降解木屑基质中木质纤维素的规律。结果表明,三株白腐菌对木屑基质中纤维素、半纤维素和木质素三者的降解具有一定的顺序和选择性,即先降解半纤维素和木质素,再同时降解半纤维素、纤维素和木质素;从降解比例来看,三株菌对木质素具有很强的降解优势(45%左右)和选择性(0.5左右)。木质素的相关谱带(1630,1510,1325 和 1265 cm-1)强度及半纤维素和纤维素的相关谱带强度(1740,1325,1160 和 898 cm-1)的变化也证实了这一结论。 相似文献
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采用碳二亚胺法偶联系统素多克隆抗体和水溶性CdSe/ZnS量子点,制备了系统素量子点免疫荧光探针( antiSys-CdSe/ZnS),并对该探针的特异性和荧光特性进行了研究.结果表明,antiSys-CdSe/ZnS和系统素多克隆抗体的中点效价分别为1∶3.21×104和1∶9.45×104,两者对系统素的免疫识别能力近似;体系中硼酸缓冲液的pH为9.0时,antiSys-CdSe/ZnS量子点荧光探针溶液的荧光强度最强,其荧光强度约为原量子点荧光强度的47%;在牛血清白蛋白(BSA)存在时,antiSys-CdSe/ZnS 的荧光强度明显增加;当体系中含有1% BSA时,antiSys-CdSe/ZnS溶液的稳定性和荧光强度最佳. 相似文献
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