过敏原肌质钙结合蛋白在毕赤酵母中的表达、优化及免疫反应性研究

目的 探究天然肌质钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium binding protein, SCP)的可替代物,为蟹类过敏原的检测提供基础材料,本研究首次利用毕赤酵母(Pichia pastoris, P. pastoris)高效表达表达三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)重要过敏原SCP,并检验其免疫反应性。方法 根据毕赤酵母的密码子偏好性优化SCP基因并构建重组质粒。将其热激转化至P. pastoris GS115菌株后经遗传霉素(Geneticin, G418)筛选获得阳性高拷贝子。最后通过甲醇诱导表达重组SCP并结合免疫印记(Western blotting, WB)和间接酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)验证其免疫反应性。结果 SCP在P. pastoris GS115中实现了可溶性高效表达,其表观分子量约为28 kDa。在摇瓶水平下,最佳诱导条件为pH为6.0、每24 h添加1.0%(v/v)甲醇,于28℃发酵144 h,在此条件下,纯度为91.6%的SCP产量可达15 mg/L。WB和间接ELISA结果表明,重组SCP具有IgG结合能力。结论 毕赤酵母表达系统可以得到纯度较高且免疫反应性良好的重组SCP。本研究为SCP的理化研究及产业化应用奠定了基础,并有望促进特异性甲壳类过敏原检测的发展。     

三相桥式整流电路功率因数PSPICE仿真分析

分析了LC无源功率因数校正电路和纯阻性负载的三相桥式整流电路所能达到的极限功率因数 ,并在此基础上 ,优化了一种无源校正电路的结构和参数 ,最终将功率因数校正到0 991。     

单相开关电源功率因数校正的仿真分析与优化

升压型有源功率因数校正电路不可能将功率因数校正到1，该结论本文将利用PSPICE仿真软件来证明。本文提出了一种能将功率因数校正到0．992的无源功率因数校正新电路，给出了优化后的电路参数，讨论了负载变化对功率因数的影响。     

在Transputer网络上实现五层数值预报模式的试验

本文介绍在Transputer网络上并行计算五层数值预报模式的一个方案:用一个Transputer芯片完成一层的计算量,最大限度地缩小层间数据交换,试验结果的令人满意的.     

一株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌噬菌体qdsa002的分离鉴定及其生理学性质研究

为探究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的生物防治方法,从青岛市团岛污水处理厂采集到的污水中分离得到了一株噬菌体qdsa002。借助噬菌斑形态、酶切、电镜等技术对其进行了分类鉴定。研究了其最佳感染复数、一步生长曲线、p H稳定性和热稳定性等生理学特征。结果表明,qdsa002核酸属于线型双链DNA,具有正多面体的头部及较长的尾部,qdsa002头部直径约47 nm,尾长约120 nm,属肌尾噬菌体科。生理学特征研究结果表明,qdsa002在双层平板上能形成清晰透亮的噬菌斑。最佳感染复数为0.001,潜伏期40 min,爆发期180 min。在p H为5~9范围内能够保持良好的生理活性。在温度不高于50℃条件下裂解性能良好。该噬菌体可用于防治MRSA感染的生物制剂。      

响应面法优化坛紫菜中镉的脱除工艺及其营养品质变化

探究超声辅助柠檬酸对坛紫菜中镉脱除的最佳工艺条件,并评价其对坛紫菜营养品质的影响。通过单因素实验研究柠檬酸浓度、超声功率和超声时间对坛紫菜中镉脱除率的影响,进而以镉脱除率和坛紫菜色差为响应指标,利用Box-Behnken实验对以上因素进行响应面优化,并分析脱除前后坛紫菜的营养品质变化。结果表明,坛紫菜中镉的最佳脱除工艺为柠檬酸浓度0.06 mol/L、超声功率220 W和超声时间20 min,此时,镉的脱除率为98.5%,藻体脱除前后的色差为3.149。应用该工艺条件处理,坛紫菜的基本营养成分未受到显著影响,蛋白质和脂肪酸仍保持较好的营养质量。该脱除工艺操作简单,镉脱除效果好,且不影响坛紫菜的营养品质,为工业生产中解决坛紫菜的镉脱除问题提供思路。      

酪氨酸酶为基础的时间温度指示系统的初步研究

利用酪氨酸酶催化酪氨酸褐变的原理开发了一种新型的时间温度指示系统（TTIs）。在液态条件下,研究了不同温度对TTIs的褐变程度的影响。并且初步研究了TTIs在固相载体上的颜色变化。结果表明,反应体系在0℃和5℃时,经过0⁴8h体系的颜色由原来的无色变为褐色,最终变为明显的黑色（指示终点,灰度值42.05±2.00）,而在35℃条件下,体系的颜色经过4h就到达指示终点。进一步将酪氨酸固定在海藻酸钠-羧甲基纤维素钠混合薄膜上与酪氨酸酶液进行反应,颜色变化非常显著。实验证明,以酪氨酸酶为基础的酶型TTIs具有良好的发展前景。本研究为我国生鲜食品流通的监测提供了新的选择,为消费者选择物有所值的新鲜食品提供方便。      

高效液相色谱法测定食品中的酸性橙Ⅱ

建立食品中非食用色素酸性橙Ⅱ的高效液相色谱快速检测方法。样品用饱和乙腈提取,经饱和正己烷萃取除去油溶性色素及杂质,采用高效液相色谱柱分离,二极管阵列检测器(DAD)检测,结合标准物质保留时间和DAD光谱图进行定性分析,外标法定量。色谱柱为AgilentZORBAXSB-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数0.3%醋酸溶液进行梯度洗脱,检测波长为484nm,线性范围为0.01～1.0μg/mL,相关系数R2=0.9997。采用本方法对乳制品、辣椒粉、辣椒酱、卤肉制品、卤蛋、卤豆腐干6种常见基质进行验证,结果表明,HPLC-DAD测定食品中的酸性橙Ⅱ,对于1.0g样品定容至5mL、进样量为20μL时,检出限为0.05mg/kg;添加标准回收实验表明,本方法在添加水平分别为0.05、0.1、0.2mg/kg时的样品平均回收率在74.9%～100.0%之间,相对标准偏差(RSD)在1.41%～8.64%之间(n=6)。本方法准确、可靠。     

不同加工对生物胺影响的研究

为破坏生物胺结构、抑制生物胺产生、有效去除生物胺,通过HPLC-柱后衍生-FLD检测技术分析了7种生物胺(酪胺、腐胺、尸胺、组胺、胍丁胺、亚精胺、精胺)在不同加工处理后的变化情况。结果表明,超声、微波、加热对生物胺没有破坏作用,超声和山梨酸钾前处理对鲅鱼生物胺的抑制率分别为45.89%和58.36%。醋酸、泡菜汁对生物胺的去除率为17.59%和27.76%。因此,生物胺不能通过超声、微波、加热技术来消除,可以通过控制细菌生长和酸液浸提等方式来抑制和去除。     

2012年“华夏建设科学技术奖”获奖项目(三等奖) 跨座式单轨交通工程道岔设备系统安装工艺技术

一、立项背景随着经济的高速发展,为解决城市化进程中的交通制约因素,我国从国外引进了跨座式单轨交通这种安全快捷的城市交通形式。其中道岔设备作为机电一体化的高新设备系统,是保证该交通形式高安全、高可靠性运行的三大关键系统之一,我国在引进、消化、吸收的基础上已步入了国产化。开展本工艺技术的研究对保证道岔设备系统的安装质量、缩短施工周期、确保单轨交