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目的 克隆葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因 ,构建其真核表达系统并表达目的蛋白。方法 采用高保真PCR从金黄色葡萄球菌FRIS6B株中扩增全长SEB ,目的片段T A克隆后测序。重组质粒pUCm T SEB经酶切获得的pUCm T SEB基因片段与真核表达载体pPIC9K连接。将重组真核载体pPIC9K SEB转化入P .pastorisGS115株 ,经PCR筛选并鉴定pPIC9K SEB P .pastorisGS115。在 0 5 % (v v)甲醇诱导下 ,采用SDS PAGE检测重组SEB(rSEB)的表达 ,并对rSEB的N端氨基酸序列和诱导人脐静脉内皮EVC 30 4细胞分泌IL 1α和TNFα的作用进行了检测。结果 所克隆的SEB基因核苷酸及氨基酸序列的同源性分别高达 98 84 %~ 10 0 %和 10 0 %。表达的SEB在SDS PAGE图谱的位置与预期相符。rSEB氨基末端氨基酸序列与预期完全相符。rSEB与SEB商品有相似的促人脐静脉内皮细胞EVC 30 4分泌IL 1α和TNFα的活性。结论 已成功地构建了SEB的真核表达系统 ,为进一步分析SEB分子中毒性相关活性位点、定位突变获得减毒或无毒的突变体奠定了基础。 相似文献
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基于电网配电线路设备智能化检修等业务需求,对基于增强现实技术的配电线路设备检修系统进行了设计与研究。该系统依托增强现实技术,借助AR眼镜、智能手机等智能设备,通过快速响应码(二维码)及特定图形识别等技术,在工作场景中快速识别并显示变压器、门禁、杆塔和线路等设备的台账、检修次数、运行状态以及常用检修方法等信息。该系统已在国内某电力公司成功部署,现场应用证明,该系统切实改进了电网设备检修作业的工作方式,提高了作业质量、工作效率及标准化水平,在行业内具备实用性和推广性。 相似文献
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