排序方式: 共有21条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
2.
3.
基于细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)的细胞疗法是癌症治疗的关注热点之一,获得足够数量具有功能的效应细胞是临床应用的重要环节,而实现效应细胞高密度培养,减少培养体积,是降低治疗成本的有效途径。黄原胶作为一种信号分子,具有调控细胞增殖的活性。为此,以外周血单个核细胞为研究对象,以总细胞扩增倍数、效应细胞比例和扩增倍数,以及扩增后CIK细胞对K562细胞的杀伤活性为评价指标,考察了黄原胶对CIK细胞体外高密度扩增的影响。结果显示:当接种密度为4×106 cells×mL~(-1)时,在含有100μg×mL~(-1)黄原胶的无血清培养基中,总细胞扩增倍数可达到150.0±29.1,显著高于不含黄原胶对照组的41.1±5.1(p0.05);CD3+CD56+细胞的比例和扩增倍数分别为(16.7±7.6)%和321.4±48.6,显著高于对照组的(13.2±6.8)%和71.4±31.3(p0.05);而且添加黄原胶时扩增后CIK细胞对K562细胞杀伤活性的均值可从28.7%增加到34.3%。该研究结果可为CIK细胞体外扩增过程的优化提供技术支持。 相似文献
4.
pH值和盐浓度对金属螯合亲和层析分离人胰高血糖素样肽-1融合蛋白的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨pH值和盐浓度对金属螯合亲和层析(Immobilized metal ion affinity chromatography,IMAC)分离含His-Tag标签的人胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)融合蛋白的影响,并确定最佳洗脱条件。方法在0.50mol/L盐浓度条件下,分别取pH6.0、7.0、7.8和9.04种缓冲液进行咪唑梯度洗脱;在合适的pH值条件下,分别取氯化钠浓度0.25、0.50和0.75mol/L3种缓冲液进行咪唑梯度洗脱。分析在不同pH值及盐浓度条件下洗脱融合蛋白所需要的咪唑浓度及回收率。结果在所考察的pH值范围内,洗脱融合蛋白所需的咪唑浓度随洗脱液pH值的升高而逐渐降低,当洗脱液pH值为7.8时,融合蛋白的分离效果最佳,大部分杂蛋白被0~40mmol/L咪唑洗脱液去除且不含融合蛋白,而绝大部分融合蛋白在咪唑浓度达80~200mmol/L时被洗出,总回收率达(83.7±1.0)%,且比例较高;在此pH值条件下,氯化钠浓度达0.75mol/L,才会影响融合蛋白的回收率,氯化钠浓度为0.25或0.50mol/L的洗脱液洗出融合蛋白的效果相近;在pH7.8,含0.25mol/L氯化钠的洗脱体系下,用50mmol/L咪唑溶液洗脱杂蛋白,200mmol/L咪唑溶液洗脱融合蛋白,融合蛋白的回收率和比例分别可达(85.2±2.0)%和(80.5±1.0)%。结论在所考察的pH值和盐浓度范围内,提高洗脱液pH值和盐浓度均可降低洗脱融合蛋白需要的咪唑量,但也会降低融合蛋白的回收率。 相似文献
5.
目的 分析转瓶和方瓶培养过程中造血细胞亚群组成的变化。方法 观察培养过程中脐血单个核细胞总细胞扩增倍数 ,CD34+ 细胞、CD33+ 细胞、CFU GM、CD4 1+ 细胞、CFU Mk和BFU E占总细胞的比例及其随培养时间的变化。结果 14d的培养中 ,无论是用转瓶和方瓶 ,总细胞不断扩增 ,CD34+ 细胞含量在第 7天、CFU GM含量在第 10天、BFU E含量在第 5天达到最高 ,而后出现分化 ,转瓶和方瓶培养的CD34+ 细胞和CFU GM和BFU E含量差异无显著意义 ;CFU Mk则不同 ,其含量在转瓶培养第 7天时达到最高 ,而在方瓶第 10天达到最高 ,在转瓶中CFU Mk的含量一直低于方瓶培养 ;两种培养过程中CD33+ 细胞比例均在 5 0 %~ 70 %之间 ,而且差异无显著意义。转瓶培养中CD4 1+ 细胞含量到后期出现下降 ,而方瓶中则一直增加。结论 与静态培养环境相比 ,搅拌环境对干 祖细胞分化速度、粒 巨噬系祖细胞和红系祖细胞的分化没有明显影响 ,但不利于巨核系祖细胞的扩增 ,促进了其分化 相似文献
6.
为了研究层流剪切力对造血干细胞体外扩增及向各系造血祖细胞分化的影响,考察了在3组不同大小层流剪切力0、0.03、0.06 Pa的作用下,CD34+细胞为起始细胞的造血干/祖细胞体外扩增和向各系祖细胞分化的情况.结果表明:3组总细胞、CD34+细胞及CD34+38-细胞的扩增无显著性差异;0.03 Pa层流剪切力使造血干细胞更易于向红系祖细胞系分化;0.06 Pa层流剪切力使其更易于向粒-巨噬祖细胞系分化;无层流剪切力作用下造血干细胞更易于向混合系祖细胞系分化. 相似文献
7.
低温冷冻对CIK细胞诱导及活性影响的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究低温冷冻对CIK(cytokine-induced killer cells)细胞诱导及活性的影响,方法 用经过程序降温仪冷冻后的脐血单个核细胞定向诱导CIK细胞,其活性与用新鲜的脐血单个核细胞定向诱导生成的CIK细胞进行比较,并对冷冻过的经21d诱导生成的CIK细胞,与未冻存过的细胞进行活性比较。用乳酸脱氢酶(LDH)分析法分析细胞毒活性,用流式细胞分析仪分析CIK细胞的纯度。结果 冻存后的脐血单个核细胞诱导生成的CIK细胞在扩增能力、纯度和细胞毒性方面与新鲜细胞诱导生成的CIK细胞无明显差异;经过冻存的CIK细胞在纯度和细胞毒性方面与未冻存前也无明显差异。结论 对于CIK细胞的临床应用具有指导意义。 相似文献
8.
目的筛选扩增培养前后脐血CD34+细胞差异表达基因。方法将新鲜分离的CD34+细胞设为对照组,经静态和动态培养系统扩增的CD34+细胞设为试验组,应用基因差异显示技术(DDRT-PCR)比较两组之间的基因表达差异,对差异表达基因片段进行克隆、测序及生物信息学分析,并且通过半定量RT-PCR方法验证基因差异表达的真实性。结果应用差异显示技术筛选出5个差异表达基因,其中4个为已知功能基因,1个为未知功能基因,对其中2个基因RAN和DC24进行半定量RT-PCR检测表明,在静态和动态体系扩增培养后的CD34+细胞内,RANmRNA的表达水平分别是新鲜分离细胞的1.521和3.978倍,DC24mRNA的表达水平分别是新鲜分离CD34+细胞的14.275和2.374倍。结论发现了与CD34+细胞体外增殖相关的一些重要基因,为从基因水平调控CD34+细胞体外增殖提供依据。 相似文献
9.
10.
尽管居住区的环境构成不能直接影响人们交往的质量,但建筑师和规划师却能影响人们相遇、观察和倾听他人的机会。这些交往活动的机会既有其自身的质量,也由于它们构成了其他形式交往的背景和起点而具有重要意义。 相似文献