番茄乙烯信号转录因子LeERF2在大肠杆菌中的表达和纯化

从破色期番茄果实中提取了总RNA,用RT-PCR方法从中克隆到了627bp全长LeERF2基因.测序结果分析表明,该LeERF2基因序列与已发表序列的同源性为100%.将LeERF2基因亚克隆至载体pET-30a上,构建了原核表达载体pE-LeERF2,将其转化到大肠杆菌BL21中.蛋白质诱导表达的温度为37℃,诱导剂IPTG浓度为1mmol/L,诱导时间为3 h,LeERF2表达蛋白在细菌沉淀中约占菌体总蛋白的58%.应用Ni-NTA亲和层纯化回收的LeERF2表达蛋白的纯度为99%.银染凝胶阻滞实验表明,LeERF2蛋白能与含有GCC盒的逆境相关的几丁质酶启动子基因TLBP1结合.     

番茄乙烯信号转录因子LeERF1多克隆抗体制备及应用

为研究番茄乙烯信号转录因子LeERF1在蛋白水平的生化活性及生物学功能,通过免疫兔子制备了抗LeERF1多克隆抗体,抗体的效价大于10000.抗LeERF1多克隆抗体经DEAE-52离子交换柱纯化,纯度达到99%.纯化的抗LeERF1多克隆抗体具有免疫特异性.蛋白印迹试验结果表明,粉红期番茄果实中LeERF1蛋白含量与番茄青霉茵侵染有相关性.     

单轴联合循环机组大功率高可靠性供热技术及应用

<正>获奖情况：2022年中国安装协会科学技术进步奖二等奖一、成果研究背景基于运行灵活性及可靠性考虑,大功率、连续集中联合循环供热机组均采用多轴机组,但多轴机组设备相对较多、占地面积较大,投资成本较高,在经济发达、工业用地紧张地区成为不利因素,开展单轴联合循环机组大功率高可靠性供热技术及应用研究,并实现单机效率提升,参数最优,以达到节约用地,降低造价的目的,具有必要性。     

杭州湾跨海大桥非通航孔桥船舶拦截体系施工技术

杭州湾跨海大桥非通航孔共需设5个区域防船撞拦截体系,由于高墩区的大桥墩台本身抗撞击能力较弱,故选择独立于大桥墩台的防撞方案.拦截体系由独立防撞墩+拦截索链+锚泊钢浮体+锚碇沉块组成.阐述杭州湾跨海大桥非通航孔桥典型区域上下游设置的船舶拦截体系工程的施工关键技术,包括施工过程船机设备的合理配置、关键施工工艺和安全保证措施.     

番茄乙烯信号转录因子LeERF1基因克隆和蛋白表达

为研究乙烯信号转录因子的功能,提取破色期番茄果实总RNA,通过RT-PCR获得615bp全长LeERF1基因。测序结果表明,与已发表序列同源性为100%。将LeERF1基因亚克隆至载体pET-30a上,构建原核表达载体pET-LeERF1并转化到大肠杆菌BL21中。采用诱导温度37℃,诱导剂IPTG浓度1mmol/L,诱导时间3h,LeERF1表达蛋白在细菌中占菌体总蛋白的28%。