甲型流感病毒在贴壁MDCK细胞上增殖条件的优化

目的确定甲型流感病毒在贴壁MDCK细胞上最佳增殖条件。方法将3株甲型流感病毒(H1N1 NYMC X-181、H1N1 NYMC X-275和H3N2 NYMC X-263B)在贴壁MDCK细胞上进行传代培养,以其血凝效价和半数细胞感染剂量(median cell culture infective dose,CCID50)为检测指标,分别对其增殖条件胰酶浓度(0.5、1.25、2.5、3.5和4.5μg/m L)、MOI(0.000 1、0.001、0.01、0.1、1)、培养温度(33、34、35、36、37℃)、吸附时间(0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h)、培养时间(24、48、72、96、120 h)进行优化。结果 H1N1 NYMC X-181、H1N1 NYMC X-275和H3N2 NYMC X-263B 3株流感病毒在贴壁MDCK细胞上增殖的最适胰酶浓度分别为2.5、1.25、1.25μg/m L;最适MOI值均为0.01;最适培养温度均为34℃;最适吸附时间分别为1.5～2.0、1.5、1.5 h;最适培养时间均为72 h。结论确定了3株甲型流感病毒在贴壁MDCK细胞上的增殖条件,为后续相关疫苗的研发工作奠定了基础。     

MDCK细胞库的建立、检定及其生物学特性

目的建立MDCK细胞的主细胞库及工作细胞库,并进行检定,同时评价其生物学特性。方法从欧洲细胞保藏中心(European Collection of Authenticated Cell Culture,ECACC)引进1株MDCK细胞,经传代扩大培养后,分别建立主库及工作细胞库。按照《中国药典》三部(2015版)规定的方法对细胞库进行细胞活力、细胞形态、无菌、支原体及细胞内外源病毒因子检查,并对细胞生长状况、传代稳定性、流感病毒敏感性进行检测。结果建立的MDCK细胞主种子库及工作种子库细胞形态呈不规则的上皮样细胞状,生长状态良好,细胞活率分别为96. 0%和95. 5%,无菌、支原体及细胞内外源病毒因子检查结果均合格。MDCK细胞生长曲线均呈S型,培养48～96 h进入对数生长期,随后进入平台期。连续传10代48 h细胞活率在93. 0%～95. 5%之间,较稳定。MDCK细胞对流感病毒较敏感,对B型流感病毒的敏感性高于A型流感病毒。结论建立的主细胞库及工作细胞库各项检测结果均符合《中国药典》规定,具有良好的传代稳定性及流感病毒敏感性。     

汽轮机级组通流能力诊断指标及其修正方法研究

采用特征通流面积作为表征汽轮机级组通流能力大小的指标,以此诊断汽轮机级组的热力性能故障.以国产600 MW和300MW机组为例分析了该指标的准确性,并根据高压部分级组和最末级组产生计算偏差的原因,分别给出了不同的修正方法.实例计算表明,提出的修正方法可有效地提高诊断指标的计算精度.     

直接空冷系统变工况背压算法分析及最佳真空运行优化

直接空冷技术因其显著的节水优势以及投资成本低、综合换热效率高、运行灵活和防冻性能好等优点,已被越来越多的国家认同和使用,成为我国“富煤贫水”地区新建、改进和扩建燃煤发电机组的首选技术。为了获取直接空冷系统变工况下的最佳真空及其运行优化方案,对直接空冷系统变工况计算方法进行了对比研究,提出了基于数据驱动算法的凝汽器真空计算方法。利用Matlab软件进行仿真试验,得出该方法下的凝汽器真空误差最小,最为符合工程实际情况。通过基于数据驱动算法(自适应模糊推理系统,ANFIS)建立的数学模型以及分析产生误差的原因,对某600 MW直接空冷机组冷端系统进行基于最佳真空的运行优化,机组净增功率平均增加约6.02 MW,能够显著降低电厂供电煤耗率。     

乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上增殖条件的优化

目的优化乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖条件。方法以乙型流感病毒感染无血清悬浮培养的MDCK细胞,对培养条件中的MOI(10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7)、胰酶终浓度(2. 5、5、7. 5、10、15、20μg/mL)、细胞接毒密度(50×10⁴、100×10⁴、300×10⁴、500×10⁴、700×10⁴个/mL)及病毒收获时间(24、48、72、96、120 h)进行优化。同时对流感病毒在贴壁培养及无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖情况进行比较。结果乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上最适增殖条件为:MOI为10^-2、胰酶终浓度为10μg/m L、细胞接毒密度为300×10⁴个/mL、病毒收获时间为72 h。流感病毒在...     

某引水工程泵站加压输水段经济管径的确定

长距离、大流量引水工程是解决城市供水不足问题的一种重要手段,而管网投资占整个工程总投资的比例很大,因此如何合理地选择管道直径变得尤为重要。以龙河口水库—磨墩水库引水工程为例,结合考虑资金的时间价值,以工程初期投资和泵站运行费用之和最小为目标选择出经济管径,可为类似工程的设计提供参考。     

基于碳夹点技术的株洲市能源结构优化研究

株洲市作为第三批国家低碳示范城市,制定了CO2排放于2025年达到峰值的目标。在碳达峰目标约束下,减少传统化石能源的使用量,优化能源结构对降低碳排放具有重要意义。以株洲市为研究对象,分析了2015—2020年株洲市的能源消耗和碳排放情况,基于碳夹点技术确定了碳达峰目标约束下的清洁能源在一次能源中的最小占比,提出了能源结构优化方案,并结合株洲区域优势,在调整4类能源占比方面给出可行性建议。     

生物反应器高密度无血清培养全悬浮MDCK细胞和流感病毒工艺的建立

目的 优化生物反应器高密度无血清培养全悬浮MDCK细胞和流感病毒的条件,并放大培养规模,建立MDCK细胞和4种型别流感病毒的培养工艺。方法 分别在不同溶氧（DO）、pH、转速、接种密度条件下培养MDCK细胞,每24 h取样计数,优化细胞培养条件后,放大至50 L生物反应器,并接种4种型别流感病毒（H1N1:A/California/7/2009、H3N2:A/Texas/20/2012、BV:B/Brisbane/60/2008、BY:B/Phuket/3073/2013）,接毒条件为MOI=10-4,胰酶终浓度为15μg/mL,细胞密度为（1.8～2.2）×106个/mL,病毒维持液为DMEM,培养温度为甲型34.5℃、乙型33.5℃,检测病毒血凝效价、病毒滴度（CCID50）和血凝素（hemagglutinin,HA）含量。结果 在5 L及50 L生物反应器中培养MDCK细胞,活细胞密度均可在72 h后达到8.0×106个/mL,活率在95%以上;H1N1、H3N2、BV、BY的血凝效价分别为7、11、9、9 log2(HAU/25μL),CCID50均达6.5以上,HA含量分别为...