巨大芽胞杆菌（Bacillus megaterium，Bm）的抑菌活性及定殖规律分析

为进一步明确巨大芽胞杆菌（Bacillus megaterium,Bm）菌株对烟草主要病害的抑制效果,利用半叶法、对峙平板法和抑菌圈法研究了Bm对烟草花叶病毒（TMV）、黑胫病菌和青枯病菌的抑制作用;利用抗生素诱导筛选抗药性标记菌株,研究其在烟草根际土壤和叶面上的定殖规律;同时制备了生防菌发酵液制剂,测定其田间防治效果。结果表明:Bm发酵液和发酵上清液对烟草花叶病毒的抑制率分别为88.4%和74.3%;Bm无菌发酵上清液对黑胫病菌菌丝生长的抑制率为67.5%,对青枯病菌的抑菌圈直径为10.03 mm。抗药性菌株Bm-rif生长性状与野生型无差异。室内定殖试验结果显示,Bm-rif稳定定殖菌量在非灭菌土壤中为0.04×105 cfu/g,在灭菌土壤中为0.47×105 cfu/g,均显著高于叶面定殖菌量;接种TMV-GFP前24 h叶面喷施发酵液对TMV初侵染的抑制率为44.04%。菌株发酵液稀释后喷淋烟株茎基部,对烟草黑胫病和青枯病的田间防治效果分别为68.09%和51.02%。因此,Bm具有抑菌活性且能在烟草根际土壤中有效定殖,具有开发为生防菌剂的潜力。      

烤烟自然醇化和人工醇化过程中感官质量的变化

为明确烟叶最佳醇化方式和醇化时间,从而提高烟叶品质、节省醇化成本,以山东诸城复烤后的中部烤烟烟叶为试验材料,对人工醇化和自然醇化过程中烟叶感官评吸指标进行了评价分析。结果表明,两种醇化方式下诸城复烤烟样品的最佳醇化时间均为18个月左右;与自然醇化相比,人工醇化方式对烟叶品质提升效果更好。根据原料库存情况和品质需求采用合适的醇化方式和醇化时间,有利于卷烟企业提高烟叶质量、节约企业成本。     

烤烟重要致香物质与评吸质量的相关性研究

为了研究致香物质含量与烤烟评吸质量的关系,采用简单相关分析、偏相关分析、通径分析和逐步回归分析对云南、福建和湖北烟区120个烤烟样品中的28种重要致香物质与评吸香气质、香气量、吃味、杂气、刺激性和评吸总分的关系进行了研究。结果表明,与评吸质量关系比较密切的致香物质有新植二烯、2-甲基四氢呋喃-3-酮(面包酮)、芳樟醇、巨豆三烯酮-3、二氢猕猴桃内酯、异佛尔酮、γ-丁内酯、α-松油醇、β-二氢大马酮、香叶基丙酮、2-乙酰吡咯、氧化沉香醇、苯甲醇、3-乙酰吡啶、吡咯、苯乙醇和香叶醇。偏相关和通径分析发现新植二烯、2-甲基四氢呋喃-3-酮(面包酮)、巨豆三烯酮-3、二氢猕猴桃内酯和芳樟醇对感官质量的直接影响较大,新植二烯表现为(极)显著的直接负相关性,其他物质表现为直接正相关性;而苯甲醛、β-紫罗兰酮、2-甲基-2-庚烯-6-酮、巨豆三烯酮(1、2、4)、吲哚、糠醇、糠醛、5-甲基糠醛等致香物质对评吸质量影响不大。     

烤烟致香物质GC/MS指纹图谱在产区识别中的应用

为研究GC/MS指纹图谱在烤烟产区识别中的应用,实验采用同时蒸馏萃取烤烟中香气物质,GC/MS检测,构建了湖南、广西、贵州3个产区烤烟的致香物质标准指纹图谱。随机选取这3个产区及广东、河南的部分烤烟样品对建立的标准指纹图谱进行验证。结果表明,验证样品与其所属产区的标准指纹图谱相似度较高,而与其他产区标准指纹图谱的相似度较低,从而能准确的识别其所属产区。将几个产区烤烟样品的指纹图谱进行系统聚类分析,不同产区的烤烟能够很好的聚合到一类,表明构建的指纹图谱能够反映不同产区烤烟的风格特色,进一步验证了利用GC/MS指纹图谱结合系统聚类法对样品进行产区识别及风格特色定位的可行性。     

GC-MS/MS测定烟草上氟唑菌酰羟胺残留

为填补行业领域空白,本研究建立了气相色谱-串联质谱多反应监测模式(MRM)测定烟草上氟唑菌酰羟胺残留量的检测方法,并通过田间试验分析了氟唑菌酰羟胺在烟草上的消解动态。结果表明,该方法在0.001～0.5 mg/L质量浓度范围内进样浓度和响应峰面积之间的线性良好,决定系数R²=0.999 5;测定RSD为4.57%,测定定量限0.012mg/kg。在0.012、0.12和0.5 mg/kg 3个添加水平下,平均回收率在92.6%～101.7%之间,RSD在2.6%～4.5%范围内。氟唑菌酰羟胺在四川、山东两地烟草上的消解趋势符合一级动力学方程,取样间隔5 d和35 d时烟草上氟唑菌酰羟胺的消解率分别超过50%和90%,理论半衰期在5.73～9.12 d之间。国内和CORESTA暂未制定氟唑菌酰羟胺在烟草上的MRL和检测方法标准,研究结果可为其限量标准、检测标准的制定提供数据和方法参考。     

3种农药在土壤-烟株系统中的迁移降解特征

为明确甲霜灵、噁霜灵和烯酰吗啉3种农药从土壤向烟草叶片的迁移降解及在不同部位叶片中的分布特征,在烟田进行灌根施药,采用GC-MS/MS测定农药残留量,研究了灌根施药方式对烟叶农药残留的影响。结果表明,灌根施药后,3种农药在土壤中的残留量逐渐降低且降解动态符合一级动力学方程;在烟叶中的残留量先升高后降低,不同部位的残留量呈现下部叶 > 中部叶 > 上部叶的趋势。甲霜灵、烯酰吗啉在施药后第7天烟叶农药残留量低于最大残留限量标准,噁霜灵在施药后第28天烟叶农药残留量仍高于最大残留限量标准。可见,按推荐高剂量进行灌根施药后,烟叶中甲霜灵、烯酰吗啉超限风险较低,噁霜灵超限风险较高。     

南平特色烤烟非挥发性有机酸(盐)与感官质量的相关性分析

采用甲酯化、二氯甲烷萃取、气相色谱法定量检测了南平烟区烤烟中的12种非挥发性有机酸。结果表明,与感官评吸关系比较密切的有草酸、丙二酸、棕榈酸、油酸、亚麻酸、亚油酸、肉豆蔻酸和柠檬酸。简单相关分析表明,棕榈酸和亚麻酸对评吸指标表现为正相关外,其他成分都表现为负相关;典型相关分析表明,棕榈酸、肉豆蔻酸、丙二酸、亚麻酸、亚油酸、柠檬酸对感官指标的载荷较大,在典型变量中起主要作用;通径分析表明,草酸对香气质、杂气、刺激性、总得分的直接影响较大,亚麻酸对香气质、香气量、余味、刺激性的直接影响较大,亚油酸对刺激性的直接影响较大,油酸对香气量的直接影响较大,以上都表现为正向关系;丙二酸对杂气、刺激性和总得分的直接影响较大,表现为负向关系。     

紫外-可见分光光度法测定烤烟中亚硝酸盐的含量

建立了紫外-可见分光光度法测定烤烟中亚硝酸盐含量的分析检测方法。对提取时的提取液脱色、提取效果、提取液的净化以及测定时提取液的吸取量进行了试验,同时考察了方法的稳定性、精密度和准确度,并用本方法测定了不同烤烟样品中的亚硝酸盐含量。结果表明:该方法操作简单、稳定性好、精密度高、适用范围广,回收率84.8%～98.2%。该方法适用于烤烟中亚硝酸盐含量的测定。