拟青霉β-1,3(4)-葡聚糖酶同源模建、分子对接与分子动力学模拟

在同源模建得基础上,采用分子对接和分子动力学(MD)模拟方法研究了拟青霉β-1,3(4)-葡聚糖酶与β-1,3(4)-葡聚糖(G4G4G3G4G4G)和β-1,3-葡聚糖(G3G3G3G3G3G)的相互作用机制。对接结果显示,该酶对β-1,3(4)-葡聚糖具有较β-1,3-葡聚糖更高的结合力,动力学轨迹分析显示,葡聚糖酶催化β-1,3(4)-葡聚糖的机制要比催化β-1,3-葡聚糖更为复杂。     

乳酸菌代谢产物降解胆固醇作用研究

通过胆盐水解酶(BSH)定量分析、静态体外消化分析、模拟动态消化分析及不同阴离子对乳酸菌降解胆固醇的效果分析，研究乳酸菌代谢产物对胆固醇的降解作用。结果表明：LR-ZRX01、LA-ZRX02、LP-ZRX03体外胆固醇降解率分别为25.61%±1.25%、28.87%±2.16%、20.39%±1.84%,唾液静态体外消化后胆固醇降解率分别为27.35%±2.35%、34.28%±2.41%、23.53%±1.98%,胃液静态体外消化后胆固醇降解率分别为26.95%±1.56%、30.51%±2.35%、22.27%±1.15%,动态模拟消化后食糜排空泵中胆固醇降解率分别为16.22%±1.05%、20.22%±2.82%、14.78%±1.12%,仿生胃中胆固醇降解率分别为13.98%±1.13%、16.84%±1.28%、15.15%±2.04%,BSH比酶活分别为(0.388 7±0.003 9)、(0.380 1±0.006 8)、(1.216 9±0.008 3)U/mg。添加适量浓度的Cl^-、NO₃^-、SO...     

复配乳酸菌黑米发酵乳工艺优化及抗氧化活性研究

利用植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌混菌发酵制备黑米发酵乳，通过响应面试验优化发酵工艺，并测定其抗氧化活性。结果表明：当发酵时间4 h、发酵温度37℃、黑米浆与牛奶的体积比1∶1.7时，黑米发酵乳的感官评分达到86.91±3.24,具有较强的抗氧化活性。     

拟青霉β-1,3(4)-葡聚糖酶同源建模及共价固定化

采用同源建模的方法构建拟青霉β-1,3(4)-葡聚糖酶的三维结构。通过对其活性位点及表面氨基酸残基侧链的分析,利用氨基载体Sepabeads EC-HA共价固定化葡聚糖酶,优化固定化条件,比较固定化酶与游离酶的酶学参数。结果表明:m(酶粉):m(载体)=1.2:1、温度40～45℃、固定化时间8h,固定化效果最好。蛋白结合率可达91.7%,酶活回收率达87.6%,固定化酶最适温度、热稳定性、pH值稳定性和批次使用稳定性均得到明显提高。     

一种酿酒酵母表达cDNA文库分离纤维质降解酶系基因的方法

目的:建立一种筛选自然界产纤维质降解酶系基因的新方法。方法:对酿酒酵母表达载体pYES2多克隆位点加入真核生物稀有限制性酶切位点SfiI进行改造,利用SMART技术,以大肠杆菌文库为转导,构建了拟青霉(Paecilomyces sp.H28)的酿酒酵母全长cDNA表达文库。结果:利用纤维质-刚果红染色法从文库筛选到多种纤维素和半纤维素降解酶系基因。结论:成功构建了拟青霉的酿酒酵母表达cDNA文库,加快了纤维质降解酶系基因的快速分离,也为其它相关基因的快速分离提供了有益的借鉴。     

耐热β-1,3(4)-葡聚糖酶源真菌筛选、鉴定及产酶条件优化

利用葡聚糖作为唯一碳源的基础盐培养,在50℃培养条件下,从新乡周围土样及腐殖质中筛选到一株产β-1,3(4)-葡聚糖酶耐热真菌菌株(Paecilomycessp.FLH30)。该菌株在40～60℃能较好生长,最适生长温度45℃。产酶培养优化条件表明:在培养温度为45℃,初始培养基pH6.5,以大麦麸皮为碳源,以蛋白胨、酵母粉和玉米浆为有机氮源,发酵4d,葡聚糖酶活达132.4U/mL,葡聚糖酶最适pH和温度分别为7.0和70℃。     

发酵果蔬汁功能特性及生物转化研究进展

多酚具有抗氧化、抗肿瘤、抗动脉硬化、抗炎、抗病毒等生理药理活性,这些健康效应取决于人体对其生物利用度。虽然食品中天然多酚的含量很高,但由于多酚的大分子、稳定性低、被动扩散等原因,其利用率很低。乳酸菌是肠道益生菌,能产乳酸及促进营养物质的吸收,具有抗氧化、抑菌等功能,广泛用于发酵果蔬汁。乳酸菌发酵可将结合酚转化为更易被人体吸收利用的游离酚,提高多酚的生物利用度。该文对乳酸菌发酵果蔬汁中多酚成分经乳酸菌发酵进行代谢转化,提高多酚生物利用度等问题进行综述,以期为开发益于人体健康的发酵果蔬汁提供依据。