基于DNA测序方法检测生鲜肉中5种动物源性成分

目的建立生鲜肉中猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴别方法,并对采集自北京各地区生鲜肉品进行检测验证。方法合成动物线粒体上12S rRNA、cytochrome b、cytochrome c oxidase基因引物,建立猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴别方法,并对50份猪、牛、羊、鸡、鸭肉品进行检测。结果使用线粒体上12S rRNA、cytochrome b、cytochrome c oxidase基因引物对猪、牛、羊、鸡、鸭肉品进行扩增,分别获得456、400和710 bp大小的DNA片段。只有12S rRNA基因引物均可对此5种动物源性成分扩增且效果良好。扩增产物进行序列测定。根据序列构建的系统进化树发现,此方法可有效区分样品中猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分。结论此方法快速、简便,可准确检测50种生鲜肉样品中的动物源性成分,作为肉类鉴别的新方法。     

螺旋藻产品脂肪酸GC指纹图谱分析方法的研究

该实验选取了10个不同品牌的螺旋藻产品,采用气相色谱法对螺旋藻产品脂肪酸指纹图谱进行了研究。结果表明,通过对螺旋藻产品脂肪的提取并进行甲酯化反应,添加内标后采用气相色谱法测定其脂肪酸组成,可用于绘制螺旋藻产品脂肪酸指纹图谱。指纹图谱可以从量的角度比较多个品牌产品脂肪酸特征组分的差异,其中生物活性物质γ-亚麻酸含量在12.3%～23.0%,相对差值高达61%。所建立的螺旋藻产品脂肪酸指纹图谱具有重复性和稳定性,可用于评价螺旋藻相关产品的质量。     

大体积肉中DNA提取方法的优化

目的优化一种从大体积肉类中提取DNA的方法。方法从大组织肉上多点取样,用组织粉碎机打碎,称取10 g肉加入90 m L PBS缓冲液和450μL蛋白酶K,60℃消化至澄清后,混匀,取200μL消化液用试剂盒进行DNA提取;再与常规试剂盒方法提取的DNA在同条件进行实时荧光PCR及琼脂糖凝胶电泳验证。结果 2种方法提取DNA的Ct值差异在0.5个循环以内,无显著性差异(P0.05);电泳结果显示,2种方法所扩增的为同一产物。结论该方法取样具有代表性,可适用于大体积肉类掺假检测或动物源性成分检测中的DNA提取。