毛细管气相色谱法测定黑豆中α-、γ-亚麻酸含量

建立了一种毛细管气相色谱法,能同时测定黑豆中的α-亚麻酸和γ-亚麻酸。依次采用1%的硫酸-甲醇、15%三氟化硼-甲醇催化对提取出的黑豆脂肪酸进行甲酯化;以DB-WAX毛细管柱分离,FID检测器检测。结果表明:该柱对α-亚麻酸和γ-亚麻酸的分离效果良好,分离度2,能完全分离;以十七烷酸甲酯为内标物,采用内标法测定α-亚麻酸和γ-亚麻酸的含量,其峰面积与质量浓度均有良好的线性关系,r0.999 0;样品加标回收率(n=6)为87.5%~95%;RSD%分别为4.8%和0.9%,最低检出限为0.000 2 mg/mL。该方法能同时分离、测定黑豆脂肪酸中的α-亚麻酸和γ-亚麻酸。选取国内市场具有代表性的4种黑豆测定二者的含量,其范围分别为:α-亚麻酸:8 070~33 000 mg/kg;γ-亚麻酸:0~770 mg/kg。     

明绿豆苯丙氨酸解氨酶的分离纯化及性质初步研究

为了研究明绿豆中苯丙氨酸解氨酶(PAL)的动力学特性,采用35%和65%饱和度的硫酸铵分级沉淀、DE-52阴离子交换层析方法对明绿豆中的PAL进行了分离纯化,并对其基本性质做了初步研究。结果表明,PAL的纯化倍数为6.982 9,蛋白质得率为4.65%,酶得率为32.45%。PAL在硼砂-硼酸缓冲溶液中适宜的p H范围为7.6~9.0,最适p H有2个:8.0和8.6。PAL适宜的温度范围为35~45℃,最适反应温度为40℃。得到PAL的2个Km值,分别是:Km1为6.94×10-5mol/L,Km2为1.23×10-4mol/L。本研究结果可为进一步研究和开发明绿豆的PAL提供参考。     

Plackett-Burman试验设计及响应面法优化超声辅助提取明绿豆SOD工艺

为了充分提取明绿豆中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),选用Plackett-Burman试验设计对影响磷酸盐缓冲液提取明绿豆SOD比活力的7个因素进行评价,筛选出具有显著效应的3个因素液固比、磷酸盐缓冲液p H值和超声水浴温度。在此基础上,采用响应面分析法优化出主要影响因素的最佳参数水平。结果表明:采用液固比22∶1(m L/g)、磷酸盐缓冲液p H 7、超声功率140 W、超声时间20 min、超声水浴温度44℃、水浴浸提时间1.5 h、水浴浸提温度60℃的组合,明绿豆SOD的实际比活力为856.95 U/mg。与传统SOD源相比,明绿豆SOD含量处于较高水平,可成为一种新的植物SOD源。