四川省主要烟区土壤杂草种子库研究

为有效控制植烟区烟田杂草,于2011-2014年利用诱萌法对四川省主要植烟区土壤杂草种子库的组成及数量进行了研究。结果表明,土壤杂草种子库样品中共有15科24种杂草种子,主要分布于0~15 cm土层中。禾本科杂草为优势种群,其次为菊科杂草,再次为藜科杂草。双子叶杂草种类多于单子叶杂草,但其杂草种子数量明显少于单子叶杂草。广元烟区杂草种子库数量最大,达到19 119粒/m2;攀枝花烟区杂草种子库数量最小,为6 177粒/m2。      

烟草抗青枯病突变体153-K的抗性遗传及与农艺性状的关系

烟草青枯病是一种细菌性病害,严重影响烟叶生产,筛选抗青枯病的烟草种质并解析其抗性遗传效应对指导抗病育种具有重要意义。本研究选用感病品种翠碧一号（CB-1）和抗青枯病突变体153-K为亲本,构建了F2群体,利用"主基因+多基因"混合遗传模型分析方法,研究其在安徽、福建两个病圃环境下的遗传效应,并对153-K青枯病抗性与农艺性状进行相关分析。结果表明,153-K在安徽病圃中的最优遗传模型为MX2-EEAD-AD,即2对等显性主基因+加性-显性多基因模型;153-K在福建病圃中最优遗传模型为MX2-ADI-AD,即2对加性-显性-上位性主基因+加性-显性多基因模型。相关分析结果表明,在安徽、福建两个病圃环境下,青枯病抗性与株高呈显著负相关;而与叶片数、节距、茎围相关性均不显著。     

膜下小苗移栽最适地膜透光率优选研究

为确定攀西烟区膜下小苗移栽最适宜的地膜透光率,在凉山州会理县以白膜为对照,进行了不同黑膜透光率研究。试验为单因子4水平3重复随机区组设计,处理水平为白膜和3种透光率（36.39%、14.36%和2.10%）的黑膜覆盖。结果表明,白膜覆盖的处理穴内最高气温可达40.7℃,小苗成活率受到严重影响;而黑膜覆盖的穴内最高气温为35.7℃,移栽后15 d内小苗成活率均在98%以上。透光率越高,烟株更易早生快发,根冠比更高,株高、茎围、最大叶长和叶宽更长;透光率越低,烟叶外观质量、化学成分含量和协调性越好。综合来看,在当地生态条件下,使用透光率为14.36%的黑膜进行覆盖比较合适。     

NtabEXPA12基因过表达对烟草叶片发育及抗逆性的影响

细胞壁松弛因子膨胀素在调控植物生长发育和响应非生物胁迫等方面发挥重要作用,克隆烟草膨胀素基因并研究其功能可为烟草叶片发育调控和抗逆育种提供理论依据。本研究从普通烟草K326中克隆了一个膨胀素基因NtabEXPA12及其启动子ProNtabEXPA12,通过实时荧光定量PCR、亚细胞定位和过表达等对该基因进行了功能研究,分析了启动子包含的顺式作用元件和活性。结果表明,NtabEXPA12在烟草叶片中具有较高的表达量;ProNtabEXPA12中包含多个响应高盐、干旱和植物激素的顺式元件,并且其活性受到高盐、干旱和ABA等的诱导;过表达NtabEXPA12通过调控细胞扩展促进转基因烟草叶片的生长发育,并可以提高转基因K326对高盐和干旱的抗性。因此,NtabEXPA12在烟草叶片发育调控及抗逆育种中具有潜在的应用前景。     

泸州市土壤氮钾供应水平与烟草氮钾吸收利用规律研究

[目的]摸清川南地区烟草土壤氮钾供肥水平、烟叶的氮钾吸收利用规律.[方法]研究了泸州市植烟土壤氮钾舍量和变化水平,烟株不同时期生物量增长和增长率,烟叶氮钾吸收量和钾氮比.[结果]植烟土壤氮素供应和烤烟对氮素的吸收不好,钾素供应和吸收较好,钾含量和钾氮比高;烤烟移栽后15 d左右土壤氯钾含量过高,流失严重.中后期不足,生物量较低,烤烟旺长期后移,烤烟生物量增长与氮钾供应不协调.[结论]应减少前期氮钾供应量,加大和调整移栽后45～75 d氮钾供应,保持移栽后75 d后一定量钾素的供应.提高烤烟生物量和烟叶舍钾量.     

烟草过氧化氢酶基因CAT2克隆与表达特征分析

基于已有的植物Catalase 2基因（CAT2）序列设计烟草Nicotiana tabacum CAT2的特异性引物,通过RT-PCR扩增克隆获得Nicotiana tabacum var.NC89 CAT2全长mRNA序列,包含1479 bp完整的读码框（ORF）,可编码492个氨基酸残基。遗传进化分析显示,烟草NC89 CAT2与N.benthamiana CAT2基因亲缘关系最近。利用Quantitative Real-time PCR技术分析了CAT2基因在NC89烟草中的组织特异性表达和其应对生物和非生物胁迫的表达差异。结果表明,CAT2基因在烟草NC89的根、茎、叶、花瓣、花萼、种子中均有表达,其中在花中相对表达量最高,其次为叶、茎、种子和根。生物和非生物胁迫处理烟株,其CAT2诱导表达分析显示,机械损伤、渗透压、低温和高温、干旱和感染PVY时CAT2表达量均上调。上述研究表明烟草CAT2基因可能参与了应对非生物和生物胁迫的过程。     

K326全基因组分子模块库构建及其农艺、抗病性状评价

为构建烟草全基因组模块库，开展烟草分子模块育种，以K326为轮回亲本，烤烟OX2028和香料烟Samsun为供体亲本，经过杂交、连续多代回交、自交，最终获得两套以K326为背景，覆盖供体亲本整个基因组的分子模块库。分子模块的基因组大部分回复到了轮回亲本K326，其田间农艺及抗病性等重要性状偏向亲本K326，不同材料间存在较广泛的遗传变异；群体的基本农艺性状呈现连续的正态或近似正态分布，符合数量性状的表型分布特性；鉴定了7个重要性状显著改变的分子模块，其中较K326中上部叶片开片明显改善的材料32份，叶数明显提高的材料25份，TMV、CMV、PVY病毒病抗性明显提高的材料分别为111、25和5份，黑胫病、青枯病抗性显著提高的材料44和52份。构建的烟草分子模块库可用于后续开展烟草重要性状的QTL定位和基因功能研究。     

光照强度对烤烟漂浮育苗成苗素质的影响

以烤烟幼苗为试验材料,采用白纱布遮光方法,设置了自然光、透光68.2%、透光35.4%和透光16.7%4个光照强度处理,研究了光照强度对漂浮育苗成苗素质的影响。结果表明:随着相对光照强度的减弱,烟苗高度增加,茎围、干鲜比、叶片厚度和比叶重等均呈现降低的趋势,烟苗物质积累减少,光强对烟苗叶数的影响不大;遮光条件下生长的烟苗根系不发达,根冠比和根重比减小,根系活力下降;光照强度会影响烟苗的含水率,遮光条件下的烟苗自由水含量增加,束缚水含量降低,适宜光照条件下生长的烟苗则保水能力较强,遮光程度越大保水力越低;随着光照强度的减弱,烟苗叶绿素含量增加,Chla/Chlb比值减小;遮光条件下烟苗的硝酸还原酶活性升高,转化酶活性降低,表明烟苗体内的氮代谢强于碳代谢,抗逆性降低;随着光强的减弱烟苗总氮和蛋白质含量增加,总糖和烟碱含量降低。总之,随着育苗环境的光照强度降低成苗素质下降。     

烟草NtbHLH112基因的克隆、鉴定及表达模式分析

bHLH转录因子在植物响应逆境胁迫过程中起着极为重要的调控作用,克隆和验证烟草中bHLH相关基因可为烟草抗性育种提供理论依据。本研究从普通烟草品种K326中克隆出一个NtbHLH112基因,通过生物信息学方法分析了NtbHLH112功能结构域,利用亚细胞定位及转录激活试验进行了功能鉴定,并利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析了其在不同逆境胁迫下的表达模式。结果表明,NtbHLH112具有典型的bHLH结构域且进化较为保守,定位在细胞核,具有转录激活的活性。进化分析表明,NtbHLH112与番茄SlbHLH112和辣椒CabHLH112同源。表达模式分析表明,NtbHLH112基因具有组织表达特异性,在叶部表达量较高,并且受到盐、干旱、冷胁迫及ABA处理诱导。因此,NtbHLH112转录因子可能在烟草非生物胁迫应答过程中发挥重要作用。     

四川省烟草白绢病病原菌的分离鉴定及其生物学特性

烟草白绢病是近年来在四川烟区发现的新病害,为明确其病原特征,进而有效防治该病害,在烟田采集了烟株根部菌丝,进行分离、纯化,并命名为B1。并进行了病原菌形态观察,18S rRNA鉴定及致病性测定。结果表明,B1为半知菌亚门,丝孢纲,无孢目,小菌核属的齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc。生物学特性研究表明,白绢病菌B1菌丝和菌核致死温度为50℃处理10 min,且菌丝更适合在偏酸性条件下生长,最适pH为5.0。