氯霉素人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

采用重氮化法合成氯霉素人工抗原.通过紫外扫描、凝胶电泳、基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MAL-DI-TOFMS)鉴定人工抗原.用该人工抗原免疫兔子,获得多抗血清.采用酶联免疫法测定抗体效价,并对ELISA条件进行初步优化.选择与氯霉素结构相似的4种药物进行交叉反应,计算交叉反应率.结果表明免疫抗原偶联率为1:22,最佳包被抗原质量浓度为0.25μg/mL,抗体效价128 000.优化后,通过间接竞争ELISA法建立标准曲线,IC50为0.26μg/mL,4种药物与抗体的交叉反应率均小于0.1%,特异性显著.     

木材-钢夹板螺栓连接的承载能力试验研究

文章主要研究木材-钢夹板螺栓连接在顺木纹受拉时的承载能力.通过试验研究,对4组不同厚度木材共20个螺栓连接试件的结构性能进行了对比,同时深入研究了其不同破坏模式和破坏机理.木材-钢夹板螺栓连接的破坏模式、承载力大小及其延性性能均与连接中木材厚度的相对大小有关.木材-钢夹板螺栓连接在现代木结构中具有广泛的应用前景,其研究成果可为我国现代木结构的加工、设计和应用提供参考.     

抗Cry1c蛋白兔单克隆抗体的制备和鉴定

通过原核质粒表达重组Cry1c晶体蛋白,将其纯化后作为特定抗原免疫兔子。经多抗血清效价的测定,细胞融合,杂交瘤细胞的筛选,构建重组载体等步骤获得抗Cry1c单克隆抗体。通过ELISA方法测定单克隆抗体相关特性,结果表明,Cry1c兔单克隆抗体效价超过3.2×104,其亲和常数为2.4×109L/mol,该单克隆抗体与Cry1Ac蛋白有微量交叉反应,与Cry1Ab蛋白无明显交叉反应。间接ELISA检测抗原Cry1c蛋白时,当包被量为400ng/mL时,判定为阳性。     

抗β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)兔单克隆抗体的制备和鉴定

通过免疫兔子、细胞融合、筛选杂交瘤细胞、构建重组载体、抗体纯化等步骤,成功制备出抗β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)兔单克隆抗体。运用间接ELISA法测定该兔单克隆抗体的相关特性,结果表明该兔单克隆抗体的效价为64000左右,亲和常数为2.13×109L/mol。间接ELISA检测β-GUS蛋白时,其最低检测限为50ng/mL。本次试验为研制定性或定量检测β-GUS蛋白的ELISA试剂盒奠定了基础。