荧光光度法快速定量大肠杆菌的实验方法研究

研究比较了菌体渗透处理方式与培养方式对大肠杆菌荧光光度法检测效果的影响,以及考察了培养条件对荧光强度的影响,结果表明仅采用渗透处理方式处理菌液会造成荧光检测值偏小,灵敏度偏低;但经LST-MUG（pH7.0）培养液44℃培养7h后的荧光值能对100.9～106.8cells/mL范围内的大肠杆菌进行定量,结果与国标方法无显著性差异。该法进一步缩短了大肠杆菌的检测时间至8h左右,且重现性良好,适合于大肠杆菌的定量检测。     

响应面法优化微量热法检测用菌体培养基的实验研究

利用微量热法对酱牛肉中的细菌进行快速定量检测,需要对检测用菌体培养基进行优化从而实现其快速增殖,以期缩短检测时间,同时放大细菌生长热信号。本文采用Plackett-Burman实验设计确定了培养基配方的主要因素后,再用最陡爬坡实验及Box-Behnken实验设计进一步确定了各因素的最优水平。实验结果表明,葡萄糖、pH、胰蛋白胨三个因素是影响酱牛肉中优势细菌生长的主要因素;优化后的最佳培养基配方为:葡萄糖1.42g/L、胰蛋白胨8.45g/L、硫酸镁0.2g/L、氯化钠5g/L、酵母浸膏4.5g/L、pH7.12。用此培养基培养酱牛肉中的细菌,可实现其快速增殖,并显著缩短生长延滞期。