茶叶浸提液微波辅助萃取过程中溶剂选择的差异

研究了绿茶中活性成分儿茶素单体在不同性质的溶剂(甲醇、乙醇、水、乙酸乙酯)下,微波辅助萃取的效率和选择性差异。实验结果发现,酯型儿茶素单体(L-EGCG和L-ECG)用甲醇或乙醇萃取较用水萃取效率高,其他三种简单儿茶素单体(L-EGC,D,L-C,L-EC)则是以纯水作为萃取溶剂萃取效率为佳。乙酸乙酯对儿茶素各单体的浸出量相对水、甲醇和乙醇都大幅减少。适当增加萃取溶剂的离子浓度,会有利于微波辅助萃取效率的提高,但溶剂的离子浓度过大时,会降低儿茶素各单体的浸出量。     

响应面法优化脂肪酶的固定化条件及其水解橄榄油的特性研究

采用Sepharose CL-4B和7种大孔树脂为载体固定Palatase 20000L脂肪酶,对载体进行筛选,以酶活力为指标,采用响应面法优化固定化条件,并考察所制得固定化酶的稳定性和水解橄榄油的酶学性质。结果表明：以大孔树脂HPD-600为载体制得的固定化酶具有较高的活性和良好的稳定性。其最优的固定化条件为：pH3.9,酶与载体比例为9.1mg/g,吸附时间1.8h。在最优条件下制得固定化酶在最适合条件下测得的酶活力达到1440U/g,酶活回收率大于50%。固定化酶最适作用温度为50℃,最适作用pH值为8.0。固定化酶的Km值为0.130g/mL,高于游离酶的Km(0.069g/mL)。固定化酶的热稳定性有一定程度的提高,其重复操作5次后相对酶活力仍保持在58%以上。     

抗黄曲霉毒素B1单链抗体的表达载体的比较

目的：比较4 种不同的pET 载体在表达抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的单链抗体(scFv)克隆的特点,确定用以表达scFv-H4 的合适载体。方法：将目的基因H4 分别克隆到载体pET20b、pET22b、pET28a 和pET32a 上,分别转入大肠杆菌BL21(DE3)或Origami(DE3)中,比较诱导过程中细胞的生长状况和诱导结束后细胞破碎液中scFv-H4的生物活性以及细胞各部分包涵体。结果：pET20b 和pET22b 能表达具有生物活性的scFv-H4,这些具有生物活性的蛋白主要存在于周质中;pET28a 和pET32a 不能表达有生物活性的scFv-H4,而pET32a 仅能在细胞质中产生大量的包涵体。结论：pET22b 可能是表达AFB1 的单链抗体较优的表达载体。     

绿茶和红茶浸提液对α-淀粉酶的抑制作用研究

研究绿茶和红茶浸提液对猪胰α-淀粉酶的抑制作用。对绿茶和红茶进行浸泡提取得到茶浸提液,采用非连续测定和Dixon作图法研究其对猪胰α-淀粉酶的半抑制浓度和抑制机理。发现绿茶和红茶对猪胰α-淀粉酶的半抑制浓度分别为8.99mg/mL和10.01mg/mL(以干茶叶含量计),二者的抑制类型都为可逆非竞争型抑制,绿茶和红茶的抑制常数分别为9.42mg/mL和11.51mg/mL(以干茶叶含量计)。茶浸提液与猪胰α-淀粉酶相互作用后的紫外差谱显示茶浸提物导致了猪胰α-淀粉酶紫外吸收的增强和峰的移动。