DNA甲基化对奶牛乳腺上皮细胞乳脂和乳糖合成的影响

以健康的泌乳期中国荷斯坦奶牛的乳腺上皮细胞(DCMECs)为实验模型,构建DNMT3A过表达载体pcDNA3.1-DNMT3A,用脂质体转染奶牛乳腺上皮细胞,采用荧光定量PCR技术检测奶牛乳腺上皮细胞中DNMT3A的mRNA表达,采用Bovine milk fat ELISA KIT检测细胞中的乳脂含量,采用Bovin...     

miR-9-5p对奶牛乳腺上皮细胞乳脂合成的影响

以健康的泌乳期中国荷斯坦奶牛的乳腺上皮细胞(Dairy cow mammary epithelial cells,DCMECs)为实验模型，探究mi R-9-5p对奶牛乳腺上皮细胞乳脂合成的影响。通过体外转染mi R-9-5p mimics的方式处理奶牛乳腺上皮细胞。随后采用MTT方法测定细胞增殖能力，采用western blotting技术检测乳脂合成相关信号通路蛋白SREBP1的表达情况，再采用甘油三脂检测试剂盒检测奶牛乳腺上皮细胞中甘油三脂含量的变化。实验结果显示mi R-9-5p对奶牛乳腺上皮细胞的增殖有明显的抑制作用，同时mi R-9-5p对乳脂合成相关信号通路蛋白SREBP1的表达也有明显的抑制作用，且显著抑制甘油三脂的合成，说明mi R-9-5p对奶牛乳腺上皮细胞乳脂的合成有着负调控作用。本实验试图从分子水平揭示中国荷斯坦奶牛乳品质差异的原因，进一步完善中国荷斯坦奶牛泌乳的分子机制。