鹰嘴豆纳豆液态发酵高产蛋白酶的培养基及发酵条件优化

为了提高纳豆中的蛋白酶活力,以纳豆芽孢杆菌为菌种,对鹰嘴豆纳豆液态发酵进行优化。以蛋白酶活力为指标,采用Plackett-Bnrmao法筛选出三个对蛋白酶活力影响最大的因素:装液量、转速和鹰嘴豆粉添加量。通过响应面优化鹰嘴豆纳豆液态发酵的培养基和发酵条件,建立二次回归模型的拟合度良好,对提高蛋白酶活力影响显著(p<0.005),所得最佳培养基为鹰嘴豆粉添加量5.9%,豆粕粉1.0%,葡萄糖0.6%,氯化钠0.5%,最佳发酵条件为:转速250 r/min,装液量76 mL/500 mL,温度37℃,发酵时间48 h。该条件下发酵所得蛋白酶活力达(3558.0±1.5) U/mL,相对于对照培养基的(2491.4±2.8) U/mL提高了42.8%,且纤维蛋白平板法验证的纳豆激酶溶解圈面积提高了108.6%。结果表明,优化后的鹰嘴豆纳豆液态发酵能有效提高蛋白酶活力。     

油酸诱导对灵芝三萜生物合成途径中关键酶编码基因的影响

通过实时荧光定量PCR技术考察油酸诱导对灵芝三萜生物合成途径中关键酶基因转录水平的影响。主要选择SQS、CYP51和14α-LDM3个关键酶基因做试验。在不同浓度油酸、不同诱导时间和最佳诱导条件下,3个基因响应油酸诱导的变化情况各不相同。结果表明,油酸可使SQS和CYP51两个灵芝三萜生物合成途径中的关键酶基因上调表达,从而使灵芝菌丝体胞内三萜产量大幅度提高。油酸对14α-LDM酶基因主要为抑制作用,从而抑制麦角甾醇这一代谢途径,间接提高灵芝三萜产量。