核磁共振研究未知聚合物结构

利用超导核磁共振(NM R)通过测定某一未知聚合物的1H和13C谱,对该聚合物的化学位移进行了归属,确定了该聚合物的成分及其结构。     

一种高档PU亚光漆用醇酸树脂的开发

以豆油酸、苯酐、新戊二醇、二甘醇和季戊四醇等原料合成了用于PU亚光漆的醇酸树脂。讨论了原料的种类及合成工艺对漆膜消光性能的影响。以经过优化选择的醇酸树脂配制的高档PU亚光漆具有良好的消光性。     

基于哺乳动物细胞系的重组乙酰胆碱酯酶表达载体构建研究

：目的 构建具有不同信号肽、载体骨架元件以及乙酰胆碱酯酶编码基因序列的真核表达载体,为基于哺乳动物细胞系表达重组乙酰胆碱酯酶提供前期研究基础。方法 通过NCBI数据库查询苍蝇头部、电鳗鱼发电器官来源的乙酰胆碱酯酶基因序列(mdAChE和eleelAChE),经密码子优化后,选择Humaninsulin、小鼠重链、Human CD33 3种信号肽序列,将其与合成的上述目的基因连接后分别与pCMV3、pcDNA3.1(+)、pcDNA3.4 3种载体骨架元件进行组合,构建重组乙酰胆碱酯酶的表达载体,随后分别在CHO-S、Expi293F细胞系中进行瞬时转染表达,产物采用镍柱亲和纯化后进行SDS-PAGE与WB分析鉴定。结果 经菌落PCR及DNA测序鉴定,成功构建了4种重组mdAChE酶的表达载体以及3种重组eleelAChE酶的表达载体。SDS-PAGE、western blot的结果表明,基于pcDNA3.1(+)和pcDNA3.4载体骨架元件的重组表达载体可实现重组mdAChE和eleelAChE酶的可溶表达;以pCMV3为载体骨架元件的表达载体,仅在以Human CD33为信号肽时,在CHO-S细胞系中实现重组mdAChE酶的可溶表达,其余情况下均未见有效表达。结论 实现了昆虫、鱼类来源的重组乙酰胆碱酯酶在哺乳动物细胞系的可溶性表达,发现载体骨架元件、信号肽类型对其重组表达具有重要影响,CHO-S以及Expi293F细胞均适合重组乙酰胆碱酯酶的表达,后续还需对影响其酶活、农药敏感性的关键限制性因素开展深入地研究。     

一种快干易打磨PU底漆用醇酸树脂的开发

以苯酐、豆油酸、甘油和季戊四醇等为主要原料合成了用于PU底漆的快干醇酸树脂。讨论了原材料种类及用量对树脂性能的影响。经优化选择的树脂用于配制PU底漆,漆膜干性及打磨性优异。     

新型冠状病毒核衣壳蛋白抗原的重组表达及其单克隆抗体的制备

目的 制备新型冠状病毒SARS-CoV-2核衣壳蛋白重组抗原及其单克隆抗体。方法 根据公布的新冠病毒全基因组序列,构建其核衣壳蛋白的表达载体pET-28a-N, 并转化至E. coil BL21(DE3)进行原核表达, ELISA及Western blot鉴定纯化后的核衣壳蛋白重组抗原的特异性并免疫Balb/c系小鼠, 基于杂交瘤融合技术筛选获得可持续分泌新冠病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的细胞株, 并基于ELISA及生物膜层干涉技术鉴定单克隆抗体的特异性和亲和力。结果 基于大肠杆菌原核表达获得新冠病毒核衣壳蛋白的重组抗原, 其纯度大于90%, 筛选获得7株可分泌特异性结合新冠病毒核衣壳蛋白的杂交瘤细胞株, 经Western blot、ELISA及分子相互作用分析等方法证实所获得的单克隆抗体与核衣壳蛋白具有优良的结合特异性和结合活性, 其中的7E11、7E8单克隆抗体与核衣壳蛋白抗原的亲和力常数分别为1.69×10-9、2.031×10-9M, 可作为抗体元件应用于新冠病毒的快速免疫分析领域。结论 获得高特异性的新型冠状病毒SARS-CoV-2核衣壳蛋白重组抗原及其单克隆抗体。