蚕蛹蛋白及其水解产物中氨基酸组成分析

采用FMOC-OPA柱前衍生化-高效液相色谱法测定蚕蛹蛋白及水解液氨基酸含量,同时测定血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性,研究蚕蛹蛋白水解后氨基酸组成的改变及对ACE抑制活性的影响。结果表明:水解液10kD以下组分(SN2)中疏水性氨基酸含量为49.15%,显著高于10kD以上组分(SN1)中的40.55%及蚕蛹蛋白中的45.21%,其中对ACE抑制活性影响较大的脯氨酸、芳香族氨基酸含量为7.75%和19.20%,高于SN1中的5.62%和13.59%及蚕蛹蛋白中的7.42%和15.81%,并且SN2中ACE抑制率为47.6%显著高于SN1和蚕蛹蛋白中的抑制率,表明水解后疏水性氨基酸组成的改变与ACE抑制活性的变化趋势相同,且ACE抑制活性主要集中于SN2。     

蚕蛹蛋白精制及其氨基酸成分分析

以缫丝后蚕蛹为原料,对蚕蛹蛋白进行提取工艺优化,并测定提取后蚕蛹蛋白的氨基酸含量及分子量分布。实验结果表明蚕蛹蛋白提取最佳工艺为:固液比1∶3、提取次数3次、pH3.0,此工艺下蛋白提取率为53.0%;通过氨基酸分析发现提取前后蚕蛹蛋白氨基酸组成未发现明显变化,说明该提取方法并不会造成蚕蛹蛋白氨基酸组成的改变,并且该提取方法制得的蚕蛹蛋白不仅氨基酸种类丰富且各氨基酸配比合理,分子量分布范围从500～100000u,可进一步应用于制药、食品及化妆品等领域。      

蚕蛹蛋白中性蛋白酶可控水解动力学模型

提出了同时考虑产物抑制、底物抑制、酶失活等因素的机理模型,并应用到蚕蛹蛋白中性蛋白酶水解体系中,证明了在该体系中底物抑制现象的存在,并推导出相关动力学和热力学常数分别为Km=4.02g.L-1,k2=130.9min-1,Ks=110.4g.L-1,kd=24.6min-1,C0=1.38×10-4,rmax=15.4g.L-1.min-1和Ea=44.5kJ.mol-1,并通过实验结果比较验证模型的可靠性,结果表明计算值与实验值较为吻合,相对误差只有3.80%,说明该模型具有较好的推算性。