多重LAMP—熔解曲线法检测食品中两种食源性致病菌

针对沙门氏菌的侵袭蛋白基因(inv A)和金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因(nuc)设计LAMP引物,优化反应条件,并分别对反应产物进行熔解曲线分析,判断扩增结果,从而建立食品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌多重LAMP—熔解曲线检测方法。对9株目标菌和23株非目标菌的检测未出现假阳性和假阴性结果,并可通过熔解曲线的熔解温度分析确定所含目标菌;对产物的测序分析表明所得序列与目的基因序列吻合;对目标菌的检测灵敏度均可达到10 fg/μL;对232份样品的检测结果显示,其中2份生猪肉中检出金黄色葡萄球菌。该方法具有良好的检测特异性,并可为食源性致病菌的快速检测提供一种重要技术手段。     

基于扩增子测序分析益生菌牙膏中菌群多样性

通过常规方法检测益生菌牙膏中的活性菌，并采用高通量测序技术对20种市售益生菌牙膏16S rDNA的V3、V4区进行测序，扩增子测序分析不同牙膏中的菌群结构并进行α多样性分析，最后基于特异性引物，使用PCR方法检测20种牙膏中副干酪乳杆菌成分。结果表明：1)20种益生菌牙膏菌落总数均<10 CFU/g，乳酸菌总数均<10 CFU/g;2）通过扩增子测序结果分析，牙膏中还添加了干酪乳杆菌以外的乳酸菌，有18种牙膏中添加了发酵乳杆菌、嗜酸乳酸杆菌和德氏乳杆菌亚种，20种牙膏中添加了植物乳杆菌，19种牙膏中添加了罗伊氏乳杆菌。高通量测序对原核微生物的α多样性分析，表明牙膏中原核微生物丰度和菌落多样性较高；3）牙膏DNA提取物通过PCR及测序，结果表明20种牙膏均按标签标识添加了副干酪乳杆菌。