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培养NIH3T3细胞,结合免疫印迹和细胞免疫荧光染色法,对p70的S6激酶(p70^S6k)及其第411位丝氨酸(Ser^411)处于磷酸化状态的细胞定位进行研究.利用免疫荧光染色技术,发现p70^S6k存在于细胞的各个部分,而Ser^411磷酸化后的p70姒只存在细胞核内.将细胞核与细胞质分离,并利用抗磷酸化Ser^411的抗体进行免疫印迹分析,发现只有细胞核部分才出现免疫条带,说明Ser^411磷酸化后的p70^S6k特异性地存在于细胞核当中. 相似文献
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介绍意大利SNAICO公司FCT3000SX型纺丝机纺练车间的通风空调设计原则,并与国产R535A型离心纺丝机纺红车间通风空调能耗进行对比。 相似文献
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通过皮下注射花生粗蛋白的致敏方式,建立Balb/c小鼠花生过敏模型,探讨食物过敏的发病机制.将16只Balb/c小鼠(雌性)分为PBS对照组和模型组,利用伊红苏木精(haematoxylin and eosin,H&E)染色,用透射电镜观察小鼠肠道炎症和肠绒毛病理变化,发现花生过敏模型组较PBS对照组可见小肠黏膜水肿和炎症细胞浸润,组肠微绒毛严重损伤;通过伊文思蓝尾静脉注射,模型组中小鼠足部出现明显蓝色,而对照组无明显变化;模型组腹腔灌洗液细胞相对PBS对照组炎症细胞数目显著增加,主要以嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和肥大细胞为主,且肥大细胞活化状态明显;酶联免疫吸附法检测发现,血清中IgE、IL-4、IL-5、IL-6和组胺的水平及腹腔上清液组胺的水平,模型组明显高于对照组(P<0.05),IgG2a和IFN-γ的水平模型显著低于PBS对照组(P<0.01).花生模型组较对照组出现一系列的过敏病理变化,为开发治疗花生过敏药物提供了良好的动物模型. 相似文献
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泛素化是一种存在于真核细胞中与生理功能密切相关的蛋白修饰,泛素化与去泛素化处于动态调节过程中。 Ubp3是与人USP10同源的酵母去泛素化酶,结合辅引子Bre5在细胞内发挥广泛作用。为研究该复合体的工作机制,制备重组蛋白复合体,在大肠杆菌中成功表达并纯化重组Ubp3与Bre5单体及Ubp3/Bre5复合体,首次成功大规模制备重组Ubp3/Bre5复合体。通过一系列pulldown实验,检验Ubp3/Bre5与AAA家族中泛素选择性ATP酶Cdc48的相互作用模式,结果发现, Ubp3及Bre5无法单独与Cdc48结合,但Ubp3/Bre5复合体可以有效与Cdc48相互作用。提出了Ubp3/Bre5-Cdc48相互作用的新模式,制备了高质量重组Ubp3/Bre5复合体。该研究为通过生化及结构生物学进行分子机制探索奠定了基础。 相似文献
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目的建立了蒸发光散射-亲水作用色谱法测定味精和鸡精中的谷氨酸钠。方法色谱柱为Venusil HILIC(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温30℃;流动相为0.02 mol/L醋酸铵(冰醋酸调p H=3.5)-乙腈(80∶20,V/V);流速1.5 ml/min;检测器为蒸发光散射检测器(ELSD);样品经水超声提取,提取液过滤后供仪器分析。结果谷氨酸钠在6.0~20 g/L浓度范围内线性良好,味精和鸡精的平均回收率分别为98.5%和94.7%,RSD分别为1.07%和2.14%(n=5)。结论该方法适用于味精和鸡精中的谷氨酸钠的测定。 相似文献