枯草芽孢杆菌DC⁃1产维生素K2的发酵条件优化

为提高微生物发酵法生产维生素K2 的产量和多样性,对枯草芽孢杆菌DC?1 的发酵条件进行优化。采用单因素试验对其发酵条件包括碳源、氮源和无机盐进行初步优化,通过Plackett?Burman（PB）试验筛选出对DC?1产维生素K2具有显著性影响的因素,应用响应面Box?Behnken 设计优化获得DC?1 的最优发酵条件。结果表明,DC?1产维生素K2的最优发酵条件为甘油添加量36.5 g/L、糖蜜添加量31.8 g/L、黄豆粉添加量32.5 g/L、KH2PO4浓度0.3 g/100 mL、K2HPO4·3H2O 浓度0.8 g/100 mL、MgSO4·7H2O 浓度0.7 g/100 mL、NaCl 浓度0.5 g/100 mL。在该条件下,MK?7 产量达到94.66 mg/L,比初始发酵条件提高了48.04%;同时菌株DC?1产维生素K2 的多样性增加,经液相色谱?质谱联用（liquid chromatograph mass spectrometer,LC?MS）鉴定能同时产5 种MK 同系物,分别为MK?2、MK?3、MK?4 和MK?7,其中一个类似物未能在高分辨率质谱中找到,根据保留时间推测其为MK?5 或MK?6,可为维生素K2 的工业化生产和探索维生素K2 同系物的生物活性奠定基础。