?微生物法制备松仁肽-锌螯合物及其抗氧化功能的研究

实验研究了微生物法制备松仁肽-锌螯合物及抗氧化性质,利用松仁粕为原料制作培养基,选用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ls-45为发酵菌种,以硫酸锌为锌源,运用微生物法进行螯合,微生物将大分子的松仁蛋白分解为小分子肽的同时与锌离子螯合,以硫酸锌的添加量、发酵温度、发酵时间、pH 4个因素进行单因素实验和响应面实验对螯合工艺参数进行优化,以螯合率为指标,确定最佳的工艺参数为:硫酸锌添加量为0.6 g,时间为50.36 h,温度为38.46℃,pH值为7.41。得到最佳螯合率90.60%。通过体外抗氧化实验对松仁肽-锌螯合物、松仁肽、VC等物质的不同浓度进行DPPH自由基清除率、还原能力、羟自由基清除率等3个指标的测定,实验结果表明松仁肽-锌螯合物的抗氧化性均高于松仁肽,并随着质量浓度的增加而呈现量效关系,由此可以初步判断松仁肽-锌螯合物具有良好的抗氧化功能。     

D-海因酶和水解酶在中华根瘤菌中的增强表达

以质粒pBBR1MCS-5为载体,将D-Case和D-Hase基因以多顺反子形式置于其lac启动子控制下,转入中华根瘤菌,经30℃发酵培养24 h,在不添加诱导剂的情况下,总酶活比野生菌提高了2倍. 为减少葡萄糖效应,将lac启动子替换成lacUV5,对核糖体结合位点进行优化,工程菌的酶活比野生菌提高了4倍,达0.5 U/mL.