对硫磷酶联免疫吸附分析方法的建立和评价

通过制备对硫磷的多克隆抗体,建立了对硫磷的间接竞争酶联免疫吸附分析方法(icELISA)。通过活泼酯法将半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,获得免疫抗原和包被抗原。使用对硫磷抗血清,经优化条件参数建立了对硫磷的icELISA分析方法。该方法检测线性范围为3.39～533.05ng/mL,最低检测限为0.90ng/mL,对蔬菜样品和水样品的平均添加回收率为75.6%～127.4%,能用于实际样品中对硫磷的检测。     

氟喹诺酮药物格林沙星抗体制备及其icELISA方法建立

目的:制备格林沙星多克隆抗体并建立间接竞争酶联免疫吸附分析方法(icELISA)。方法:采用碳二亚胺法将格林沙星偶联于牛血清白蛋白(BSA)作为免疫原,免疫新西兰大白兔获多克隆抗体;采用活泼脂法分别将格林沙星、克林沙星、加替沙星、培氟沙星和沙拉沙星偶联于卵清白蛋白(OVA),制备5种包被抗原并做性能比较;建立icELISA方法并对其灵敏度和特异性进行评价。结果:成功制备了免疫原和包被抗原及抗体,抗体效价最高达64 000倍。以克林沙星-OVA作异源包被,建立的icELISA方法灵敏度最高,半抑制药物浓度(IC50)为9.14 ng/mL,检测限(IC10)为0.9 ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为2.3~36.4 ng/mL,与其他喹诺酮类药物无明显交叉反应。结论:首次制备出格林沙星抗体并建立间接竞争酶联免疫吸附检测方法,该法灵敏度高、特异性强,为分析生物样品中格林沙星含量的测定提供了1种新的方法。     

魔芋葡甘聚糖改性及其应用

综述了魔芋葡甘聚糖酯化、醚化、交联、接枝共聚等化学改性及其应用的研究,指出了存在的问题和发展前景。     

活性炭对枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的作用

考察了活性炭对枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶液的脱色与纯化作用。结果表明,酶液在脱色温度50℃、活性炭量3%、吸附时间2h条件下,不仅可使酶液脱去一部分色素,并纯化酶3.77倍,收率达到86.19%±2.99%。     

荧光偏振免疫分析技术研究进展

荧光偏振免疫分析技术是一种均相荧光免疫分析法,具有快速、灵敏和环保等优点.本文对这一技术的研究进展作了评述,介绍了荧光偏振免疫分析技术的基本原理、优越性、示踪物结构设计、制备、及其应用.     

不同温度、pH值对β-葡聚糖酶活力的影响研究

采用DNS比色法测定不同温度和pH值对β-葡聚糖酶活力的影响,研究结果表明,β-葡聚糖酶最适反应温度为50℃,最适pH值为4.8。在pH2.0和pH 8.0的缓冲液中浸泡4h后,酶活分别保留了73%和64%。说明β-葡聚糖酶能够耐受较强的酸碱性环境。     

基于二氧化锡/碳化硅空心球纳米链的电化学传感器检测食用油中黄曲霉毒素B1

在电极基底和抗体探针修饰生物相容性良好的二氧化锡/碳化硅空心球纳米链、聚苯胺纳米线、金纳米颗粒等纳米材料,放大电化学信号,提高检测灵敏度,构建黄曲霉毒素B_1直接竞争检测电化学传感器。结果表明:该传感器对黄曲霉毒素B_1的检测线性范围为3.81pg/mL～1.00μg/mL,检出限为1.13pg/mL。传感器具有良好的稳定性、重现性和特异性,对食用油的检测添加回收率在84.6%～107.6%,变异系数在5.42%～10.49%,可应用于食用油中黄曲霉毒素B_1的快速筛查。     

食品安全免疫层析检测技术研究进展

免疫层析技术(immunochromatography assay, ICA)不仅有效结合了层析法卓越的分离能力以及常规免疫分析方法的高度特异性,而且简单、快速、灵敏,为现场即时筛查提供一种理想的技术手段。近年来,免疫层析技术在食品安全检测中不断更新、完善和发展,包括标记材料、信号增强、高通量和定量分析等的技术革新,显示出巨大的发展潜力和广阔的应用前景。本文总结归纳了ICA在食品安全检测中的最新应用进展,汇总分析了ICA在我国食品安全领域标准化的情况,并讨论了ICA现有的不足以及在未来应用中的发展方向,以期为我国食品安全快速检测的发展提供技术参考。     

利用同相等差感应电势法检测膨化食品中阿斯巴甜的研究

利用同相等差感应电势法,向初级线圈施加5 V～20 V激励电压和300 Hz～500 Hz频率的激励参数,探究次级线圈中阿斯巴甜溶液的电学特性。结果发现,0～100 mg/kg阿斯巴甜溶液的瞬时绝对电压与初级线圈激励电压大小呈正相关,但不随频率变化而改变。20 V、300 Hz条件下,100 mg/kg阿斯巴甜溶液电势差较50 mg/kg提高32.46%,当阿斯巴甜质量分数增加时,体系电势差随激励电压增加而增大。阿斯巴甜质量分数、激励电压、频率及体系电势差呈线性相关,相关系数（r）为0.94。利用同相等差感应电势与化学法检测5种市售膨化食品中的阿斯巴甜总含量,其检测结果相对误差均在2.50%以内,同相等差感应电势法具有良好的重复性和准确性。将膨化食品预处理后的料液作为次级线圈,通过同相等差感应电势法测定其电信号特性来量化阿斯巴甜总含量,为膨化食品中阿斯巴甜的检测提供了一种新技术方法。     

直接竞争ELISA法检测蜂蜜中氯霉素残留

建立蜂蜜中氯霉素直接竞争酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测方法。以抗氯霉素单克隆抗体为包被原,氯霉素-辣根过氧化物偶联物为标记物,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺作显色底物,对其主要影响因素,如标准品稀释液、包被温度、包被抗体稀释倍数等6?个因素进行优化,同时还对该方法的准确性和稳定性进行考察。结果表明：所建立的直接竞争ELISA标准曲线方程式为y=－17.425x＋97.509,相关系数R2为0.991?2,IC50值为0.63?ng/mL,检出限和线性检测范围分别为（0.04±0.01）ng/mL和0.10～4.17?ng/mL;另外整个检测反应过程耗时约为40?min。蜂蜜样品的检出限和定量限分别为0.15?ng/g和0.33?ng/g,添加回收率在97.58%～100.94%之间,批内变异系数和批间变异系数均小于11%,表明该方法具有高精确度和稳定性。