超高效液相色谱-串联质谱法同时测定海蛇药酒中11种化学成分

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定海蛇药酒中多种成分的含量。方法 采用Agilent EC-C18色谱柱(4.6 mm×50 mm, 1.8 μm),以水(0.1% 甲酸)-乙腈(0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速0.2mL/min,进样量10 μL柱温为30℃;采用电喷雾离子源进行正离子模式监测,多反应监测模式(MRM)用于定量分析。结果 1-甲基海因、紫丁香苷、绿原酸、升麻素苷、芦丁、香草酸、木犀草苷、阿魏酸、黄芩苷、槲皮素、蛇床子素分别在0.1234～6.170(r=0.9991)、0.03340～1.670(r=0.9996)、0.2578～12.89(r=0.9998)、0.3220～16.10(r=0.9992)、0.04975～2.488(r=0.9992)、0.02592～1.296(r=0.9991)、0.1001～5.005(r=0.9991)、0.1054～5.270(r=0.9994)、0.000685～0.03425(r=0.9986)、0.00542～0.2710(r=0.9996)和0.2822～14.11 mg.L^-1(r=0.9993)线性关系良好,平均回收率在97.4%～103.5%,精密度RSD为0.34%～2.02%。结论 该方法快速、专属性强、灵敏度高,可用于海蛇药酒的质量控制。     

产琼胶酶菌株Agarivorans sp.FG15的筛选鉴定与酶学性质

从中国南海热带海洋环境中分离纯化出产琼胶酶菌株FG15,并以16S rDNA进行分子鉴定,分析其酶学性质。FG15为革兰氏阴性球菌,对硫酸链霉素,氨苄青霉素,羧苄青霉素和氯霉素都不敏感。通过16S rDNA序列分析和BLAST同源性比对发现:FG15菌株的16S rDNA序列与船蛆杆菌(Teredinibacter turnerae),噬琼胶菌属(Agarivorans sp.)对应序列同源性最高,为95%。利用MEGA 5.0软件构建系统发育树,FG15与噬琼胶菌属(Agarivorans sp.)亲缘关系最近,同源性高达99%。因此,可以初步鉴定FG15为噬琼胶菌属(Agarivorans sp.)。酶学性质的研究表明:FG15所产琼胶酶的最适温度为36℃,在20~45℃之间热稳定性较好;最适pH为7.5,在pH 7.0~8.0之间酸碱稳定性较好;产酶主要为胞外酶;琼脂酶的动力学参数米氏常数Km为4.978mg/mL,最大反应速率Vmax为10.33μmol/(L·min)。