酸冷胁迫下保加利亚乳杆菌定量PCR内参基因的筛选

实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术具有灵敏度高、特异性强、重复性好、定量准确等优点,被广泛应用于目的基因表达的定量分析,而筛选表达水平稳定的内参基因是提高qRT-PCR结果准确性的重要前提。保加利亚乳杆菌既是酸奶发酵剂的常用菌种,又是引起酸奶后酸化的主要菌种。为了筛选保加利亚乳杆菌后酸化相关功能基因表达分析的qRT-PCR内参基因,以保加利亚乳杆菌的模式菌株ATCC 11842为试验菌株,根据前期ATCC11842菌株在后酸化不同条件下转录组学测序结果,选择5个候选内参基因（16SrRNA、rpoB、ldh、rodA、recA）,通过qRT-PCR技术研究候选内参基因在酸胁迫和酸冷胁迫下的表达量水平,即Ct值变化。采用3款软件geNorm、NormFinder和Bestkeeper分析比较候选内参基因在酸胁迫和酸冷胁迫下qRT-PCR的表达稳定性,并筛选获得qRT-PCR的最适内参基因。运用筛选到的最适内参基因,分析ATCC 11842菌株的3个目的基因（poxI、Ldb1301、dnaJ）在酸胁迫和酸冷胁迫下qRT-PCR的相对表达量,验证筛选的内参基因的可靠性。结果表明：同一候选内参基因Ct值在酸胁迫和酸冷胁迫下,rpoB和recA表达量变化最小。比较3个软件分析结果,一致得出：rpoB和recA是在酸胁迫和酸冷胁迫下表达最稳定的2个基因,即筛选出的qRT-PCR最适内参基因为rpoB和recA;3个目的基因（poxI、Ldb1301、dnaJ）在酸胁迫和酸冷胁迫下qRT-PCR的相对表达量的分析结果与前期转录组学测序结果一致,进一步证实本研究筛选的2个内参基因rpoB和recA的可靠性。本文为利用qRT-PCR技术研究保加利亚乳杆菌后酸化功能基因表达以及揭示后酸化机制及定向选育弱后酸化菌株提供了依据;也为采用qRT-PCR技术研究其它益生乳酸菌引起酸奶后酸化或不同条件下功能基因表达提供借鉴。     

希腊酸奶工艺及乳清利用研究进展

随着消费升级的驱动,消费者对优质天然营养食品的摄取日益重视,这也为酸奶市场带来新一轮契机。希腊酸奶由于其丰富的营养和细腻浓密的口感进入了大家的视线。本文将从希腊酸奶的发展现状、生产工艺、副产品乳清的利用等方面进行阐述,以期对希腊酸奶的研制开发提供一定的理论基础。     

新疆赛里木酸奶源降胆固醇植物乳杆菌的筛选鉴定及其安全性研究

长期血清胆固醇水平升高被认为是心血管疾病的主要危险因素。新疆阿克苏地区拜城县医疗水平落后，地理环境恶劣，却被认定为世界级“长寿乡”,当地人们习惯食用家庭自制的赛里木酸奶，其被誉为“长寿秘诀”。但是目前对赛里木酸奶的研究较少，还未见有对赛里木酸奶源降胆固醇微生物的报道。该研究以从赛里木酸奶中分离筛选出的具有优良基础特性的8株疑似植物乳杆菌为样品，研究了其降胆解固醇的能力，并对高降解胆固醇菌株通过生理生化试验进一步进行了鉴定，最后通过抗生素敏感性、是否含质粒、是否产生物胺和溶血活性试验对高降解胆固醇菌株的安全性进行了初步研究。筛选出3株高降解胆固醇菌株：R2-5、R2-7和R4-2,其对胆固醇的降解力分别是48.19%、48.92%和48.50%。经鉴定确定均为植物乳杆菌，并且3株菌对部分抗生素具有抗性，但不含有质粒，不产生物胺，无溶血活性，即具有一定的安全性。该研究为下一步对菌株进行体内降胆固醇功能研究和应用提供数据支撑，对赛里木酸奶的推广具有重大意义，为开发具有我国自主知识产权的原创性益生菌提供了新资源。