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从辣根侧根中提取总RNA,以OligodT(18)为引物,通过反转录获得了辣根总mRNA的cDNA。以获得的cDNA为模板,利用设计的一对特异寡核苷酸引物P1和P2进行PCR扩增,得到了辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP,EC1.11.1.7)同功酶C2的结构基因(hrpC2)。将hrpC2与真核表达质粒载体pPICZα-A分别用限制性内切酶EcoRI和Xbal双酶切后连接,构建了重组质粒表达载体pPICZα-A-hrpC2。将pPICZα-A-hrpC2转化大肠杆菌筛选阳性克隆并测序。测序结果显示,pPICZα-A-hrpC2重组质粒构建成功。利用BlastN程序进行DNA序列分析,显示该序列为目的ORF框,无移码突变;与Fujiyama.K,Takemura.H等报道的hrpC2序列[D90115.1]有95%的同源性。 相似文献
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水泥土桩复合地基桩身强度验算是复合地基承载力计算的重要组成部分,复合地基的承载力特征值的修正问题长期为理论和工程界所争论,针对《建筑地基处理技术规范》(JCJ79-2002)有关水泥土桩复合地基承载力特征值修正后桩身强度验算的相关条文展开讨论,分析规范条文的使用条件,提出复合地基桩身强度验算及复合地基承载力特征值的修正建议,可供理论研究与工程界参考。 相似文献
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