接头连接PCR步行法鉴定转基因烟草

应用接头连接PCR步行法,建立了分子水平鉴定不同转基因事件的方法和体系;并利用不同转基因事件外源基因与植物基因组DNA整合位点处核酸序列的差异,设计了不同转基因烟草事件的标签引物,成功地对几个转TMV-CP材料进行了鉴定。     

利用杀配子染色体2C诱导中国春-长穗偃麦草1E二体附加系染色体畸变的研究

偃麦草属具有许多优良的遗传性状,利用杀配子染色体诱导小麦-偃麦草的染色体易位,是创建小麦异源易位系、丰富小麦遗传资源的一个有效途径。杀配子染色体2C在单体附加时,可高效率地诱导染色体畸变,得到易位、缺失等畸变类型。本研究利用含有杀配子染色体的中国春-柱穗山羊草2C(Ae.Cylindrical2n=28CCDD)二体附加系与中国春-长穗偃麦草(E.elongate2n=14EE)1E二体附加系杂交。观察F1花粉母细胞减数分裂情况,发现存在到量的染色体异常行为。单价体数超过理论值,棒状二价体数明显增加,并出现一定频率的三价体和四价体,及大量的染色体断片、染色体桥和落后染色体、微核,并伴随发生多极分裂现象。经C-分带与荧光原位分子杂交鉴定83株杂交F2,共检测到5株易位、6株缺失。易位频率为6.02%,缺失率为7.22%,染色体畸变的总频率为13.24%。并对杀配子染色体的诱变机制及引起杂交后代结实率降低的原因进行了讨论。     

降解乳蛋白菌株的分离筛选与鉴定

从腐败食物中分离筛选到一株可降解牛乳蛋白的菌株,并通过菌落形态观察与测定、生理生化指标测定、核酸特征分析以及16S rRNA基因序列测定等方面对该菌株进行鉴定,经BLAST比对构建了该菌株的系统发育树。经上述几方面的鉴定后,判定该菌株属于枯草芽孢杆菌。     

农杆菌介导法获得抗病毒病转基因大白菜

为获得抗芜菁花叶病毒病的大白菜植株,用携带TuMV-cp基因的农杆菌R1000和EHA105转化大白菜子叶和下胚轴,PCR、PCR-Southern检测证实TuMV-cp基因已导入并整合到大白菜的基因组中.RT-PCR检测表明TuMV-cp在转录水平上获得了稳定表达.TuMV-cp基因在转基因植株T1代中获得了稳定的遗传.抗病性鉴定结果表明转基因植株T1代较非转基因植株对TuMV的抗性增强,获得了抗病毒病的转基因大白菜植株.     

进化算法中染色体编码及初始化群体生成的一种方法

在进化算法中编码技术及初始化群体形成合理与否是影响算法稳定性及速度的关键所在。本文在对遗传算法、进化算法中各种编码方式及初始化群体生成方法进行研究的基础上，分析了现有编码方式存在的不足，提出了一种新的十进制编码方法及初始化染色体生成方法。本文将该方法用于FMS调度这样具有多约束条件的优化问题，实际表明该方法可以充分考虑多种资源，能够处理包含有关调度的丰富内容，并能对故障与急件等意外情况进行处理。最后给出了一个例子并作了简要说明。具体应用表明该方法具有编码简单、灵活、效率高、实用性强，具有可扩展性等特点，为解决具有多约束条件的FMS调度提供了一种行之有效的方法。     

耐氧性双歧杆菌的驯化及其培养条件的研究

通过对一株青春双歧杆菌的耐氧驯化,获得了具一定耐氧能力的双歧杆菌ad,该菌株可在含有一定空气容积的密闭容器中良好生长。并探讨了以大豆为主要原料发酵培养青春双歧杆菌ad的工艺条件,其最佳培养基配方为:豆浆浓度3BX,葡萄糖1%,自制乳肽0.5%,番茄汁2.5%,胡萝卜汁2.5%;pH7.0;接种量2%;培养温度37℃;厌氧培养24～48h。发酵液活菌数可达6.9×109cfu/mL。青春双歧杆菌ad发酵液原液直接冷冻干燥,无须添加其他保护剂;双歧杆菌ad冻干前增加温度前处理环节,可提高菌体成活率;双歧杆菌ad含水冻干粉活菌数达1.0×1010cfu/g;绝干样品活菌数达1.1×1010cfu/g。     

降解乳蛋白菌株中蛋白酶基因的克隆及分析

从降解乳蛋白菌株Bacillus subtilis strain ZJ06中克隆蛋白酶基因apr,分析蛋白酶基因apr结构,预测蛋白酶性质.以PCR方法从降解乳蛋白菌株Bacillus subtilis strain ZJ06基因组中扩增一碱性蛋白酶基因apr片段,对其克隆测序;提取菌体总RNA,进行RT-PCR;地高辛随机引物法标记探针,进行菌落原住杂交.结果表明,从降解乳蛋白菌株Bacillus subtilis strain ZJ06基因组中克隆到碱性蛋白酶基因apr,ORF1146bp编码382个氨基酸,理论分子量为39 ku,信号肽长30个氨基酸,是分泌型蛋白酶,蛋白酶原352个氨基酸,成熟酶275个氨基酸,GC含量51.4%,理论分子量为27.4 ku.RT-PCR、菌落原位杂交方法证实该基因的存在与表达.