适于南瓜汁原料益生酵母菌的分离鉴定及发酵工艺优化

本实验以密本南瓜(Cucurbita moschata Duch.)为发酵原料,以山西代县传统发酵酱菜中筛选所得菌株为发酵菌株。采用平皿培养及感官评价相结合的方法筛选出一株能发酵南瓜汁的酵母菌,并对其进行18S rDNA鉴定,采用邻接法(NJ)构建系统发育树,鉴定该酵母为汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)。通过模拟人工胃肠液条件测定菌株耐受性,发现该菌株耐受性较好,菌株存活率可达78.48%。通过单因素及Box-Behnken试验相结合的方法优化发酵工艺,发现接菌量、南瓜浓度、加糖量和发酵时间对工艺优化影响较大;最优工艺为接菌量15.0%,加糖量7.7%,发酵时间58 h,南瓜浓度39.0%,发酵温度32℃,110℃灭菌20 min,验证结果感官评分为91.68,与预测值相差0.37%。酵母菌株的筛选及发酵工艺的优化为发酵南瓜汁的研发应用提供理论依据。     

洋葱霍尔德氏菌对玫瑰香葡萄采后灰霉病的抑制活性

为研究生防菌洋葱霍尔德氏菌B-1的生防潜力,并为其生产性应用奠定基础,研究洋葱霍尔德氏菌B-1的生物量最大值的培养时间、浓度和发酵时间对玫瑰香葡萄采后病害的抑制效果。结果表明,在接种后24 h,拮抗菌B-1的抑菌效果最好,抑菌圈直径达2.81 cm。在液体培养基中,生防菌可有效抑制灰葡萄孢霉孢子萌发和芽管伸长,稀释5倍发酵液和发酵原液可完全抑制灰葡萄孢霉孢子萌发,稀释40倍发酵液孢子萌发率下降60.39%。在0,16℃和26℃温度条件下,拮抗菌均可显著降低葡萄采后自然腐烂率。菌株B-1不论是在离体条件还是在活体条件下,均有抑制灰葡萄孢霉的作用,能有效防治葡萄采后灰霉病的发生,是一株生防潜力较好的菌株。     

拮抗菌Burkholderia contaminans对玫瑰香葡萄采后灰霉病的抗性诱导

以玫瑰香葡萄为实验试材,研究洋葱霍尔德氏菌（Burkholderia contaminans B-1）对玫瑰香葡萄采后灰霉病的抗性诱导机理,对经拮抗菌处理贮藏后果实的腐烂率及其抗性相关物质进行测定。结果表明：拮抗菌B. contaminans B-1可有效降低玫瑰香葡萄采后腐烂率,与对照相比,果梗腐烂率降低69.58%,果肉腐烂指数降低63.93%。拮抗菌处理对果实苯丙烷代谢途径、活性氧代谢途径和其他抗性相关酶类活性均有影响。与对照相比,B. contaminans B-1处理可提高葡萄果实苯丙氨酸解氨酶（PAL）、过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）和多酚氧化酶（PPO）活性,促进过氧化氢（H2O2）含量积累,延缓过氧化氢酶（CAT）活性峰值出现的时间。此外,拮抗菌处理也可以诱导果实病程相关蛋白几丁质酶（CHI）和β-1,3葡聚糖酶（GLU）活性的上升。     

钙结合双酵母对苹果采后青霉病诱导抗性机制

水果含有丰富的营养物质,但其在采后贮藏或运输期易发生侵染性病害而导致果肉腐烂和品质下降,造成严重的经济损失。为筛选抑制效果最佳的CaCl2 浓度并探究其与双酵母最佳结合浓度下对苹果果实的抗性诱导机制,该文通过体外接种实验确定添加CaCl2 后的最佳培养时间为24 h;体内实验表明不同浓度CaCl2 诱导双酵母对苹果青霉病均有抑制效果,其中2.0% CaCl2 抑制效果最佳;通过在苹果伤口及表面处的生长动态发现2.0% CaCl2 可促进双酵母迅速定殖;2.0% CaCl2 诱导后可以显著提高苹果中苯丙烷代谢相关酶、活性氧代谢相关酶活性和物质含量。相较对照和使用双酵母复配,CaCl2 处理能够增强拮抗酵母的生防效力,一方面可以促进拮抗酵母的生长和定殖,另一方面可以降低果实的发病率并增强果实的抗病性。     

二氧化硫精准释放葡萄保鲜片的研制与应用

为开发出具有SO₂精准释放性能的新型葡萄保鲜片以解决目前保鲜片残留高、释放不稳定所引起的食品安全、环境污染和保鲜效果不佳的问题。本研究基于粉末直接压片法,采用单因素和响应面相结合的方法对精准释放葡萄保鲜片的制备工艺进行了探究,并模拟商业贮藏条件考察了其应用效果。结果表明,新型葡萄保鲜片的最佳配方为:焦亚硫酸钠用量为73.25%、微晶纤维素用量为19%、马来酸酐用量为5%、羧甲基淀粉钠用量为1%、微粉硅胶用量为1%、硬脂酸镁用量为0.75%,可使玫瑰香葡萄冷藏四个月（-0.5±0.2℃）后的好果率达95.07%,而保鲜片SO₂残留量仅为6.42%;该保鲜片药效释放稳定,具有更好的防腐保鲜效果,可使三个品种葡萄在贮藏四个月（-0.5±0.2℃）后的平均好果率达到91.89%,明显高于市售对照保鲜片的86.13%;果肉SO₂平均残留量为5.12 mg/kg,显著低于对照的17.23 mg/kg （P<0.05）。新型葡萄保鲜片SO₂释放稳定,防腐保鲜效果优异,果肉中SO₂残留低,在贮藏结束后能基本释放完全,更加安全绿色。     

洋葱伯克氏菌Burkholderia contaminans抗菌蛋白分离纯化及生物学特性分析

洋葱伯克氏菌（Burkholderia contaminans）从杏果实表面分离,实验证明其对果蔬采后多种病原真菌具有较强的抑制作用。为了进一步揭示其抑菌机理,通过菌体裂解、硫酸铵分级盐析、纤维素DE-52阴离子交换柱层析及Sephadex G-100凝胶过滤柱层析,得到一种具有抗菌活性的蛋白。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）检测结果表明,该蛋白呈单一条带,其分子质量约为17.6?kDa。粗提蛋白溶液具有一定热稳定性,在不同pH值条件下稳定,对有机试剂、紫外照射、蛋白酶不敏感。50?mg/mL的Tween-80处理粗提液,活性比对照增加了12.5%,对还原剂SDS和二硫苏糖醇敏感。     

不同品种石榴果实采后生理及果皮褐变机理的研究

以新疆大籽石榴、泰山红、蒙阳红3个石榴品种为试材,对其采后生理及果皮褐变机理进行了研究。结果表明:采后石榴果实的可溶性固形物与可滴定酸含量均呈递减的趋势,且随着贮藏期延长,膜脂过氧化产物丙二醛含量缓慢增加,细胞膜透性逐渐增大;不同品种石榴果皮多酚氧化酶活性均表现为先降低后升高的变化趋势,酚类物质的含量在贮藏前期有小幅升高后就逐渐下降;果皮褐变指数与酚类物质贮期变化呈负相关,与多酚氧化酶的相关度不高;3个石榴品种果皮褐变敏感性依次新疆大籽石榴,泰山红,蒙阳红。     

生防菌株洋葱伯克氏菌对草莓果实采后病害控制及安全性评价

采用自然腐烂法和伤口接种法研究生防菌株洋葱伯克氏菌Burkholderia contaminans(简称B-1),在不同发酵时间、处理方式和处理液对草莓果实采后贮藏的影响,并进行该生防菌的大鼠急性经口毒性实验、家兔皮肤及眼刺激性实验和豚鼠皮肤变态反应(致敏)实验。结果表明:与CK相比,生防菌B-1发酵培养24 h、采后果实浸泡3 min及稀释5倍的发酵液处理草莓果实,其采后腐烂率分别下降了55.04%、46.74%和39.98%,而且发酵原液、稀释5倍发酵液及菌悬液对草莓果实伤口接种灰霉病抑制率达100%。该生防菌的大鼠急性LD₅₀>5000 mg/kg,皮肤刺激强度和眼刺激积分指数(I.A.O.I)为0,眼刺激平均指数(M.I.O.I)48 h为0,皮肤变态反应(致敏)实验致敏率为0。本研究表明该细菌作为生防菌具有安全性,为该生防菌的生产性应用奠定基础。     

传统山西老陈醋醋化中生物活性物质动态分析

跟踪3条传统工艺山西老陈醋生产线,测定其醋化过程中的醋醅温度、酸度及生物活性物质的变化,探讨生物活性物质的生成机制,为传统山西老陈醋实现标准化生产提供理论依据。结果表明,传统工艺山西老陈醋醋化过程中,醋醅温度在醋化第9天时达到最高(37.5℃)。随着总酸和不挥发酸增长,醋醅中川芎嗪和总黄酮含量逐渐升高。醋化结束时,醋醅酸度达5.94 g/100 g,川芎嗪含量达25.6μg/m L,总黄酮含量达328.5 mg/100 g;黄酮类物质大量形成,是醋化前的3倍。