排序方式： 共有2条查询结果，搜索用时 15 毫秒
1
1.
在不同培养温度条件下对产几丁质酶C的基因工程菌BL21（DE3）进行诱导,使其表达可溶性蛋白.随后在较佳培养温度诱导条件的基础上向培养基中添加不同浓度的甘油,甘氨酸,山梨醇/甜菜碱等成分来更进一步的提高几丁质酶C的可溶性表达.其结果是在25℃诱导条件下,以添加2g/L葡萄糖的LB培养基作为基础培养基进行培养,在基础培养基中添加3g/L甘油的总酶活最高,达到了18.17 U/mL,较之仅含2g/L葡萄糖的LB培养基在37℃及25℃诱导培养条件下酶活力分别提高了41.6％和20.3％;添加0.3％甘氨酸约90％的可溶性几丁质酶表达到了胞外,胞外酶活达到14.68 U/mL;添加0.5 M山梨醇/2.5 mM甜菜碱工程菌胞内酶活达到最高,为8.43 U/mL.结果表明适当降低工程菌诱导表达时的培养温度提高了几丁质酶C的可溶性表达,在较佳温诱导表达的基础上向培养基中添加不同浓度的甘油,甘氨酸,山梨醇/甜菜碱更进一步的提高了几丁质酶C的可溶性表达. 相似文献
2.
黏质沙雷氏菌胞外几丁质酶的纯化及特性 总被引：2，自引：0，他引：2
黏质沙雷氏菌几丁质酶发酵上清液经硫酸铵沉淀、透析、DEAE-琼脂糖凝胶阴离子交换层析和苯基-琼脂糖凝胶疏水层析,得到电泳纯的几丁质酶和几丁质结合蛋白CBP21。该几丁质酶和CBP21分子质量分别约为58 ku和21 ku,CBP21对该几丁质酶水解几丁质增效明显。几丁质酶反应最适温度为50℃,最适pH约为6.5～7.0。该酶在55℃以下、pH 4.5～8.0范围内稳定。酶的Km值为0.22 mg/mL,Vm为1.26μmol/(min.mg)。金属离子K+、Sn2+、Mn2+对酶有一定激活作用,而Pb2+、Hg2+和Cu2+则强烈抑制其活性。该几丁质酶的糖基含量约为3.3%。EDTA和2-ME可分别提高酶活力65%和105%。H2O2强烈抑制酶活力,提示其活性中心可能存在硫氢基。 相似文献
1