溪蜜柚柚皮黄酮提取工艺优化

为开发利用琯溪蜜柚柚皮中黄酮资源,本文采用超声波辅助乙醇提取法对琯溪蜜柚柚皮中的黄酮进行提取研究,采用单因素和响应面分析法探究琯溪蜜柚柚皮中黄酮的提取工艺。优化的最佳提取条件为:液料比30:1 mL/g、乙醇浓度67%、超声频率163 W、超声温度35℃和超声提取时间50 min。在此条件下黄酮提取率预测值为4.84%,黄酮提取率实测值为4.90%,证明模型理论预测值与实际值拟合效果良好。本实验优化了琯溪蜜柚柚皮黄酮提取的超声波辅助提取工艺,为琯溪蜜柚黄酮的提取利用提供工艺参考。     

琯溪蜜柚幼果中柚皮苷含量变化规律

为探明琯溪蜜柚幼果作为柚皮苷提取原料的最优时期,利用高效液相色谱分析研究种植地海拔、果实发育期、果实部位、贮藏时间及加热干燥对琯溪蜜柚幼果中柚皮苷含量的影响。结果表明：高海拔地区（668 m）种植的琯溪蜜柚幼果中柚皮苷含量高于低海拔地区（40 m）种植;随着发育期的增长,果实内部白囊与绿色表皮柚皮苷含量均呈下降趋势;同一时期采摘的幼果经贮藏由绿变黄的过程中柚皮苷含量不断升高;加热干燥处理会显著降低新鲜幼果柚皮苷含量。高海拔地区（668 m）种植的I期琯溪蜜柚幼果,经过贮藏完全变黄后柚皮苷含量最高,表皮和白囊柚皮苷质量分数分别达28.3%和26.5%。研究结果为科学利用琯溪蜜柚幼果为原料制备柚皮苷提供了实验依据,具有重要的参考价值。     

琯溪蜜柚柚皮苷纯化鉴定及其对胰脂肪酶的抑制作用

为了探索琯溪蜜柚黄酮作为胰脂肪酶抑制剂的应用价值,本实验采用Sephadex LH-20葡聚糖柱层析、高效液相色谱-质谱联用、傅里叶变换红外光谱对琯溪蜜柚柚皮黄酮进行分离纯化及结构鉴定,并通过酶反应动力学和分子对接技术研究其对胰脂肪酶的抑制类型和分子间相互作用。高效液相色谱-质谱联用和傅里叶变换红外光谱分析结果表明,纯化后的琯溪蜜柚柚皮主要黄酮成分为柚皮苷;纯化鉴定的柚皮苷对胰脂肪酶半抑制浓度（half inhibitory concentration,IC50）为0.99 μg/mL,抑制类型为可逆非竞争型,抑制常数Ki＝0.58 μg/mL;该黄酮与胰脂肪酶的结合自由能为－30.14 kJ/mol,相互间的分子作用力包括范德华力、疏水相互作用、氢键、π键等,结合区域位于酶催化活性中心之外的位点。本研究表明琯溪蜜柚的主要黄酮成分柚皮苷对胰脂肪酶具有强烈的抑制作用,为利用琯溪蜜柚黄酮开发高效安全的胰脂肪酶抑制剂提供了理论依据。