应用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术分析研究畜肉中硒形态

目的 应用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术（HPLC-ICP/MS）分析研究畜肉中Se（Ⅵ）、Se（Ⅳ）、SeCys、MeSeCys和SeMet 5种硒形态。方法 采用超声辅助蛋白酶ⅩⅣ和胰脂肪酶酶解提取畜肉中硒形态,以C18反相色谱柱为分析柱,10 mmol/L柠檬酸和5 mmol/L己烷磺酸钠（pH=4.0,含1%甲醇）为流动相,等度洗脱,HPLC-ICP/MS分析。结果 5种硒形态可在7 min内有效分离,在线性范围内相关系数均>0.999,线性良好;Se（Ⅵ）、SeCys、MeSeCys和SeMet 4种硒形态检出限为0.000 3~0.002 mg/kg,不同浓度水平的加标回收率为80.0%~103.3%,相对标准偏差均小于6.8%,有证标准物质ERM^? BC210a测定值在标准值范围内。结论 该方法适用畜肉中Se（Ⅵ）、SeCys、MeSeCys和SeMet的分析测定。畜肉中的硒形态主要为SeMet,同时含有少量的MeSeCys和SeCys。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法分析人血清中的硒形态

采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱（HPLC-ICP-MS）法分析人血清中的硒酸盐（Se(Ⅵ)）、亚硒酸盐（Se(Ⅳ)）、硒代胱氨酸（SeCys2）、甲基硒代半胱氨酸（MeSeCys）、硒代蛋氨酸（SeMet）等5种硒形态。血清样品经蛋白酶超声水浴酶解后,ZORBAX SB-Aq C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm×5 μm)分离,以10 mmol/L柠檬酸和5 mmol/L己烷磺酸钠（含1%甲醇,pH 4.0）为流动相,等度洗脱。结果表明：10 min内即可实现5种硒形态的有效分离,线性范围为0.0〜100.0 μg/L,相关系数（r）均大于0.999,检出限在0.05〜0.2 μg/L之间;对添加3个浓度水平的5种硒形态混合标准溶液进行加标回收实验,正常血清中Se(Ⅳ)的加标回收率在35.1%〜39.3%之间,去除大分子蛋白后的人血清中Se(Ⅳ)的加标回收率在87.9%〜90.0%之间,正常人血清和去除大分子蛋白后的人血清中SeCys2的加标回收率在57.7%〜72.5%之间,Se(Ⅵ)、MeSeCys、SeMet的加标回收率均在80%〜120%之间;采用不同浓度水平的测试精密度考察方法的重复性,5种硒形态的相对标准偏差（RSD）均小于5%。人血清中的硒形态主要以硒代胱氨酸为主,其次为硒代蛋氨酸,还有少量的无机硒和未知硒化合物,血清中含有的大分子蛋白可能会与Se(Ⅳ)结合,导致Se(Ⅳ)加标回收率偏低。