食品中单增李斯特氏菌检测PCR-免疫胶体金 试纸条方法的建立

目的 建立食品中单核增生李斯特氏菌快速检测PCR-免疫胶体金试纸条法。方法 通过设计特异性引物建立单增李斯特氏菌检测PCR方法并使用免疫胶体金技术建立PCR产物快速检测试纸条; 用试验菌株检测PCR-免疫胶体金试纸条方法的检测特异度与敏感度。使用新建方法对市售肉制品和乳制品中单核增生李斯特氏菌进行检测, 验证该方法在食品检测中的可行性。结果 PCR-免疫胶体金法具有良好的特异度, 敏感度比标准琼脂糖凝胶电泳法高100倍。采集乳品样品131份, 阳性样品1份, 检出率1.53%; 肉制品224份, 阳性样品4份, 检测率1.79%。结论 建立的单增李斯特氏菌检测PCR-免疫胶体金试纸条法特异度好, 敏感度高, 适用于食品中单增李斯特氏菌的检测。     

肉及肉制品动物源性成分鉴别技术研究进展

国内市场近期曝光的多起肉类掺假事件引发了公众对食品安全的担忧。在肉类掺假形式层出不穷的情势下,对动物源性成分鉴别技术的研究逐步成为食品安全领域的研究热点。本文针对肉及肉制品的常见掺假形式以及免疫分析、红外光谱、蛋白质组学及分子生物学检测技术和研究现状进行综述,并对未来技术发展趋势进行了讨论。     

PCR-免疫胶体金试纸条方法检测食品中 肠出血性大肠杆菌O157:H7

目的建立PCR-免疫胶体金试纸条法快速检测食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7的分析方法。方法通过设计特异性引物建立肠出血性大肠杆菌O157:H7 PCR检测方法并使用免疫胶体金技术以及双抗体夹心法建立PCR产物快速检测试纸条并设计核酸检测展开液;将1株大肠杆菌O157:H7标准菌株和7株其他常见食源性致病菌作为试验菌株,用试验菌株检测PCR-免疫胶体金试纸条方法的检测特异度,并比较PCR-免疫胶体金试纸条法和PCR-琼脂糖凝胶电泳法的检测敏感度。结果 PCR-免疫胶体金法具有良好的特异度,灵敏度比标准琼脂糖凝胶电泳法高100倍。结论本文建立的肠出血性大肠杆菌O157:H7检测PCR-免疫胶体金试纸条法特异度好,灵敏度高,价格低廉,适用于食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7的检测。     

免疫磁珠-PCR试纸条快速检测食品中牛源成分方法的建立

建立食品中牛成分快速检测的免疫磁珠-PCR试纸条方法。免疫磁珠提取食品中核酸,设计牛特异性引物,建立牛成分快速检测的PCR-试纸条方法。验证方法的特异性、灵敏度和稳定性。该方法检测灵敏度0.01%,能够从食品中扩增出561 bp特异性DNA片段。建立的食品中牛成分检测的免疫磁珠-PCR试纸条法特异性好,灵敏度高,简便,快速,是食品中牛成分检测的有效方法。     

肉及肉制品分子生物学鉴别技术研究进展

2013年初随着欧洲"马肉丑闻"这一食品安全事件的发生,食品掺假这一全球性问题引发了公众对食品安全的担忧以及各国政府的关注。用于食品真伪鉴别的分子生物学技术包括经典的普通PCR技术、实时定量PCR技术,以及近年来逐步发展起来的分子指纹技术等。此外,基因芯片技术、多重PCR技术等可提高检测通量的新型技术近年来也得到了长足发展。随着分子生物学技术向着高灵敏度、高通量的方向发展的同时,用于样品初筛的具有较高灵敏度和准确度的现场快速检测方法和检测设备的开发也将成为未来食品真伪鉴别的研究热点之一。本文对分子生物学技术在肉及肉制品真伪鉴别的应用和研究进展进行了综述。     

食品中单增李斯特氏菌检测PCR-免疫胶体金试纸条方法的建立

目的建立食品中单核增生李斯特氏菌快速检测PCR-免疫胶体金试纸条法。方法通过设计特异性引物建立单增李斯特氏菌检测PCR方法并使用免疫胶体金技术建立PCR产物快速检测试纸条;用试验菌株检测PCR-免疫胶体金试纸条方法的检测特异度与敏感度。使用新建方法对市售肉制品和乳制品中单核增生李斯特氏菌进行检测,验证该方法在食品检测中的可行性。结果 PCR-免疫胶体金法具有良好的特异度,敏感度比标准琼脂糖凝胶电泳法高100倍。采集乳品样品131份,阳性样品1份,检出率1.53%;肉制品224份,阳性样品4份,检测率1.79%。结论建立的单增李斯特氏菌检测PCR-免疫胶体金试纸条法特异度好,敏感度高,适用于食品中单增李斯特氏菌的检测。     

《世界动物卫生组织传染病诊断PCR方法验证和质量控制指南》摘译

本文摘译自世界动物卫生组织(OIE)2008年出版的《陆生动物手册》第1.1.5章中关于核酸检测方法验证和质量控制的内容。世界动物卫生组织成立于1924年,主要职能是收集并通报全世界动物疫病的发生发展情况及相应控制措施;促进并协调各成员加强对动物疫病监测和控制的研究;制定动物及动物产品国际贸易中的动物卫生标准和规则。该章节由A-G共7部分组成。A部分是对常规分子诊断技术的介绍;B部分介绍核酸检测方法验证原则;C-G部分是方法验证过程的具体指南。由于篇幅所限,本文对A部分的综述性内容略去,重点围绕方法验证的具体流程进行摘译。目前,我国生物学检测方法(以PCR方法为主)验证的相关研究和标准化程序的制定正处于起步阶段。本文可作为我国食品分析专业人员研发和验证分子生物学检测方法提供借鉴。     

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法鉴定乳粉中致病菌

目的 采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法鉴定乳粉中的几种食源性致病微生物, 评价此技术在乳粉安全评价中的应用前景。方法 以乳粉中常见几种食源性致病菌(阪崎肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、产酸克雷伯氏菌)为目标菌, 同时分离未知菌, 通过基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱进行鉴定。结果 共从80个样品中分离到3种细菌, 分别为阪崎肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌, 阴沟肠杆菌。结论 基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱能快速对未知细菌进行鉴定, 本次实验从乳粉上分离到的细菌, 多数为条件致病菌, 存在一定的食用风险。