模拟酶解海参蛋白制备抗氧化肽及其抗疲劳活性研究

目的：采用虚拟酶解和传统酶法联用制备海参抗氧化肽,并进一步考察其抗疲劳功效。方法：以海参为原料,借助在线数据库进行虚拟酶解,对水溶性、生物毒性、致敏性等特性预测,筛选制备抗氧化肽最佳的蛋白酶,通过单因素和响应面试验考察反应温度、时间、加酶量、pH、底物浓度对海参蛋白水解度、DPPH清除率的影响,并确定最佳的抗氧化肽制备工艺参数,进一步采用负重游泳试验小鼠模型探讨其抗疲劳功效。结果：经过多轮筛选最终确定蛋白酶K为最佳蛋白酶,在反应时间2 h,加酶量350 U/g的条件下,最佳的优化工艺参数为温度50 ℃、pH 6.4、底物浓度1%,此条件得到的DPPH清除率为64.2±1.1%,与理想值接近,表明该工艺可行性良好。抗疲劳功效研究表明海参抗氧化肽对小鼠体重影响不大,能够明显延长负重游泳时间(P<0.05),显著降低血清尿素氮、乳酸含量,并增加肝糖原、肌糖原储备量(P<0.05),提升运动耐力。结论：本研究通过虚拟酶解和酶法制备了海参抗氧化肽,并通过进一步的研究表明其具有一定的抗疲劳作用。