烟草拮抗内生细菌的筛选与防病促生长效果

为了获得能促进烟草生长和防治黑胫病的稳定菌株,通过常规方法从烟草茎、叶中分离到478株内生细菌,其中65株能拮抗烟草黑胫病菌,占13.60%。菌株YN201408、YN201442、YN201448和YN201458对烟草疫霉的抑菌率分别为63.85%、60.82%、64.72%和76.07%,用1.0×107 cfu/mL拮抗菌液浸烟苗根系30 min,移栽后浇灌1次,在温室盆栽试验中控病效果分别为68.24%、65.47%、69.12和41.40%。YN201448对烟草种子萌芽率和烟草的生长都有促进作用,烟草的发芽率、第5~6真叶期苗高和地上部鲜重分别高于清水对照10.95%、29.31%和67.24%。依据菌体形态、生理生化特征和16S rDNA序列,YN201408、YN201442和YN201448鉴定为解淀粉芽孢杆菌,YN201458为铜绿假单胞菌。YN201448因良好的促生长和控病效果而具有继续开发应用的潜力。     

烟草内生细菌YN201448的定殖能力研究

为测定烟草内生细菌YN201448的定殖能力,通过自然转化法将携带绿色荧光蛋白基因的质粒pGFP4412成功导入YN201448细胞中,获得了GFP标记菌株48-pGFP。48-pGFP能稳定表达GFP蛋白,且对5种病原真菌的拮抗能力与野生型YN201448的相同。用48-pGFP菌液浸泡烟草种子和浇灌烟草苗后,在烟草的根、茎、叶等组织中都能检测到标记菌,其定殖数量分布为根 > 茎 > 叶;同时标记菌也能在根际土中稳定地定殖。激光共聚焦显微镜观察发现标记菌株主要聚集在烟草茎组织的表皮、皮层部位及维管组织。因此,YN201448可以在烟草体内外较长期定殖。