基于光胁迫粘红酵母合成高值化类胡萝卜素发酵条件优化

以模拟日光照射为非生物环境胁迫条件,通过单因素试验和正交试验对粘红酵母(Rhodotorula glutinis)合成类胡萝卜素的发酵条件进行优化,研究光胁迫对粘红酵母生长和类胡萝卜素合成的影响。结果表明：光照强度为5000 Lux时,可显著提高粘红酵母生物量和类胡萝卜素产量;碳源对类胡萝卜素的合成影响最大,以甘油和葡萄糖最佳;最佳发酵条件为甘油质量浓度20 g/L、酵母粉质量浓度3.5 g/L、初始pH值5.0、培养温度25℃;5 L发酵罐培养144 h,生物量和类胡萝卜素产量分别达14.2 g/L和17.3 mg/L,比优化前分别提高了24.5%和21.0%;光胁迫在提高类胡萝卜素产量的同时,可有效提高高值化类胡萝卜素(红酵母红素和圆酵母素)在类胡萝卜素中的占比。     

响应面法优化新型磷脂酶PLC＿MED193大豆油脱胶工艺的研究

利用大肠杆菌工程菌制备大量重磷脂PLC＿MED₁₉₃,将其应用于大豆毛油的脱胶过程中,在单因素试验的基础上采用响应面试验,得出磷脂酶用于大豆毛油脱胶的最佳工艺条件,即脱胶温度60℃、加酶量300 U/kg、脱胶pH 5.6、加水量3.0 mL、脱胶时间6 h,在此条件下,脱胶后大豆油的磷含量从36.75 mg/kg降低至(5.25±0.03)mg/kg,磷脂酰胆碱PC和磷脂酰乙醇胺PE含量降低至23 mg/g和20 mg/g,满足后续油脂精炼要求。     

霍氏肠杆菌β-胡萝卜素9,10'双加氧酶的制备及其应用

以霍氏肠杆菌（Enterobacter hormaechei）基因组DNA为模板，通过聚合酶链式反应（PCR）法扩增β-胡萝卜素9,10'双加氧酶基因，构建重组质粒，在大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）中表达，并采用高效液相色谱（HPLC）法检测9,10'双加氧酶活性。结果表明，通过镍柱亲和层析和分子筛Sephacryl TM S-200，得到纯化重组β-胡萝卜素9,10'双加氧酶，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）结果表明，该酶分子质量约57 kDa，最适反应温度为40 ℃，最适反应pH值为8.5；当底物β-胡萝卜素质量浓度为500 mg/L，β-胡萝卜素9,10'双加氧酶酶活为0.4 U/mL时，β-紫罗兰酮产量为142.3 mg/L，产率达到79.4%。