重离子束诱变呼吸缺陷型酵母菌株的筛选与快速鉴定

利用单核能为5.19 MeV/u的22Ne5 辐照啤酒酵母菌株,采用TTC筛选培养基筛选出呼吸缺陷型酵母菌株。通过一种新型而简便的限制性酶切分析手段,有效地对所筛选出的8株呼吸缺陷型酵母菌株进行遗传学鉴定。     

基于荧光探针对食物中半胱氨酸的检测方法建立

为建立食品中半胱氨酸简便、灵敏的测定方法,利用荧光光度法建立了基于Rosamine荧光探针的半胱氨酸检测体系。该探针以Rosamine为信号报告单元、以苯乙炔基为反应位点,可通过迈克尔（Michael）加成反应和分子内环化反应实现对半胱氨酸选择性检测。结果表明,在磷酸缓冲液浓度为10 mmol/L,pH9.5,甲醇/水体积比为1:9,室温反应35 min条件下,探针选择性识别半胱氨酸,其相对荧光强度随半胱氨酸浓度增大而增强。半胱氨酸在18.0~70.0 μmol/L浓度范围内与该探针响应呈现较好的线性关系（R2=0.992）,检出限为0.18 μmol/L （S/N=3）。将该方法用于水、牛奶、奶粉、白菜、苹果、梨及萝卜中检测半胱氨酸,加标回收率为96.4%~102.97%,相对标准偏差为0.1%~2%。该方法简便、灵敏度高、选择好,可用于实际样品中半胱氨酸的测定,具有较好应用前景。     

葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶的共固定化研究

研究了环氧树脂在共固定化葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化氢酶(CAT)中的应用,利用筛选出固定化效果最好的环氧树脂ES-4,考察加酶量、p H及磷酸钠缓冲液离子浓度对共固定化效果的影响。结果表明:共固定化的最佳条件是:GOD 0.5 m L、CAT 1.0 m L、磷酸钠缓冲液p H6.5、浓度1.0 mol/L,固定24 h后固定化葡萄糖氧化酶酶活回收率为35%,过氧化氢酶酶活回收率为43%。连续操作15批次后,酶活力仍能保持初始酶活的73%。该研究为工业化利用固定化酶生产葡萄糖酸钠提供了新的思路。     

呼吸缺陷型啤酒酵母菌株的重离子束辐照诱变筛选及其线粒体的限制性酶切分析

利用单核能为5.19 MeV/u的^22Ne^5＋辐照啤酒酵母菌株,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl2H-Tetrazolium chloride,TTC）筛选培养基快速筛选呼吸缺陷型酵母菌株.通过一种新型而简便的限制性酶切分析手段,发现辐照后的呼吸缺陷型酵母菌株线粒体DNA发生明显变化,主要表现在与对照相比线粒体DNA出现大片段缺失,同时出现了少量新的条带,并在此基础上初步探讨离子束辐照诱变产生呼吸缺陷型酵母菌株的诱变机理.     

雷斯青霉的复壮及水溶性离子液体对其15a-羟基化的影响

针对真菌培养过程中出现的退化问题,对雷斯青霉采用灭菌胡萝卜作为斜面培养基进行了复壮处理,并通过添加水溶性离子液体的方式提高底物的溶解与传递．结果表明：在相同培养条件下,采用胡萝卜复壮后的雷斯青霉羟基化左旋乙基甾烯双酮产15a-羟基化左旋乙基甾烯双酮．选用离子液体[EMIm][EtosO3]代替有机溶剂作为促溶剂,促溶剂添加量为4％,底物左旋乙基甾烯双酮投料量为5g／L,投料时间为30h,转化时间为72h时的产物转化率最高可达68．1％．     

耐促溶剂雷斯青霉菌株N~+注入诱变选育

在甾体生物催化过程中,向发酵液中添加亲水性有机溶剂,是增加底物溶解进而提高转化效率的有效手段,但有机溶剂对于菌体普遍具有毒性。为此采用N+注入诱变方法,对出发菌株雷斯青霉p-10-8进行改良,获得耐促溶剂菌株60 A-5-8,当投料量增大到4‰时转化率达82.61%。经过5次传代实验证明,该菌株具有较高的遗传稳定性。     

搭载水稻种子被空间重离子击中的定位研究

为了探明水稻种子在空间搭载后发生突变的原因,设计了一个“三明治”式的实验系统,采用CR-39固体核径迹探测器来探测空间离子,并利用实验系统中空间离子径迹与水稻种子的相对位置,来确定被离子击中的种子和部位。