排序方式: 共有17条查询结果,搜索用时 0 毫秒
1.
<正>为了探索构建的表达HIV-1核心蛋白Gag酵母工程菌GS115/pPCGAG的最佳表达条件,我们将该酵母工程菌分别在不同条件下进行诱导表达,通过ELJSA检测培养上清中目的蛋白的表达量来分析最佳表达条件,并分析了浓缩上清时最适硫酸铵饱和度。 相似文献
2.
3.
分别将IL-6和HIV-1gag基因插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTAL串联启动子和复合启动子(ATI-P7.5)下游,构建了重组鸡痘病毒表达质粒pUTA-GAG-IL6。经同源重组和Western blot检测,获得重组鸡痘病毒,并将该重组病毒免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠血清抗体水平和特异性CTL杀伤活性。结果获得的重组鸡痘病毒可同时表达HIV-1核心蛋白和IL-6,并在感染细胞内形成病毒样粒子。重组病毒具有良好的免疫原性,可诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫。 相似文献
4.
本文建立了用于检测鹦鹉热衣原体流产菌株的间接ELISA方法。所使用的抗原是衣原体原体相继用N-甲基甘氨酸、n-辛基-β-D-吡喃型葡萄糖处理后溶解于N-甲基甘氨酸和二硫苏糖醇中。用过碘酸钠处理包被抗原的反应板,可以增加对流产菌株抗体的特异性。用实验感染的绵羊血清和非感染的对照组绵羊血清来进行本试验的评价。监测了这些绵羊的产羔表现和MIF法。与间接微量免疫荧光试验(MIF)同用,间接ELISA对25份取之无典型胎盘病变的母羊血清中检出20份为阳性。ELISA和MIF法联合使用对来自有感染史的6个羊群的血清和4个已知非感染羊群的血清能作出准确的鉴别 相似文献
5.
目的 在原核细胞表达抗HIV-1gp120单链抗体基因,纯化后检测其活性。方法 将单链抗体基因插入pET28原核表达载体进行诱导表达,对包涵体进行变性复性处理后,利用Ni-NTA金属螯合层析柱对表达的蛋白进行初步纯化,纯化后的单链抗体与gp120标准抗原膜条反应。结果 表达产物主要以包涵体形式存在,最高表达量占菌体总蛋白量的51%,金属螯合层析一步纯化后纯度超过85%。纯化后的单链抗体可以特异地识别gp120标准抗原。结论 在原核细胞表达的单链抗体,复性纯化后具有生物学活性。 相似文献
6.
目的 构建含 HIV-2 gp 105和 gag基因的核酸疫苗,并评价其免疫效果。方法 将 HIV-2 gp 105型和gag 基因克隆到核酸疫苗载体 pcDNA3.l(+)中,构建重组核酸疫苗质粒。通过间接免疫荧光试验在细胞水平上检测gp105和ggg基因的表达产物。重组核酸疫苗免疫小鼠后,用流式细胞仪测定CD4+、CD8+淋巴细胞亚类数,用HIV-2抗体ELISA检测试剂盒检测免疫鼠血清中抗HIV-2抗体。结果 构建了3种重组核酸疫苗质粒pcgag、pcgp105和pcgag-gp105-gp105,转染BHK细胞后都能表达外源蛋白,免疫小鼠后可有效地刺激淋巴细胞增殖,并诱导产生抗HIV-2特异性抗体,其中pcgag-gp105的免疫效果较pcgag和pcgp105显著。结论 构建的重组核酸疫苗质粒均能诱导机体产生免疫反应,含有融合基因的pcgag-gp105免疫效果最显著。 相似文献
7.
竹炭(Bamboo charcoal,BC)有一定的导电性能,具有被应用于电气材料领域的潜力.为提高竹炭的导电性能,本研究以绝缘竹炭为原料进行二次炭化,研究了二次炭化温度对竹炭理化性能及结构的影响.采用元素分析仪、量热仪、比表面积及孔隙度分析仪、红外光谱仪、拉曼光谱仪、X射线衍射仪、扫描电子显微镜和透射电子显微镜对竹炭的基本理化性能及微观结构进行测试.结果表明,700~1500℃内,随着炭化温度的升高,竹炭的比表面积先增大后减小,碳含量从82.45%增加至96.87%,固定碳含量从81.22%增加至96.3%,热值从31.385 MJ/kg增加至34.904 MJ/kg,电导率从10-8 S/cm增加至92.94 S/cm;二次炭化降低了竹炭的极性,并且在纤维帽和细胞壁上形成许多大孔结构,竹炭的这种特征使其可作为复合材料的增强相;二次炭化后,竹炭形成弧形石墨边缘,石墨化程度随着温度的升高逐渐增大,BC1500的(002)峰对应的微晶尺寸为0.334 nm,接近石墨条纹间距0.34 nm.二次炭化显著增强了竹炭的导电性能,这是碳含量提高、细胞壁和纤维帽进一步收缩以及弧形石墨边缘形成的综合结果.二次炭化为高品质炭的制备提供了一种简单高效的方法. 相似文献
8.
抗HIV-1 gp120单链抗体导向SEAD227A融合蛋白原核温控型表达载体构建及表达 总被引:3,自引:0,他引:3
人工合成了能广泛识别HIV—1 gp120的单链抗体(SeFv120)基因和金黄色葡萄菌外毒素A(SEA)基因,将SEA基因第227位编码Asp(D)的密码子GAT转换成编码Ala(A)的密码子GCT,并对两基因进行密码子优化。构建原核温控型表达质粒pBV—120和pBV—SL120,经条件优化,pBV—120和pBV—SL120分别在E.coli BL21(DE3)plys中44℃诱导6h、42℃诱导7h获得最佳表达,表达量分别占菌体总蛋白的27.673%和32.519%。目的蛋白经包涵体洗脱、分子筛层析折叠复性后可与HIV—1抗原条发生良好的结合反应。 相似文献
9.
<正>艾滋病是目前人类最难控制、耗资最大的一类病毒性疾病,引起艾滋病的主要病原为HIV-1。GaP蛋白是HIV-1的主要结构蛋白之一,它在病毒的复制、成熟、感染和形态维持等方面均起着重要的作用,并能诱导机体产生体液免疫和细胞免疫。由于它在不同毒株间相对保守,因此,其诱导的抗体水平在临床上成为HIV感染的主要检测指标。Gp120蛋白是由HIV-1Env蛋白经剪切而形成的,在gp120上的C2区及其羧基末端等都与中和抗体的产生有关,因此,它已作为首选的HIV-1亚单位疫苗和重要的诊断试剂。在大肠杆菌中表达外源基因具有操作简便,成本低廉等优点。尽管有些表达的产物不能被忠实地翻译后加工,但可作为检测和诊断方面的研究。 相似文献
10.
目的 研制预防HIV -2的重组鸡痘病毒活载体疫苗。方法 将HIV -2Gp10 5基因插入鸡痘病毒转移载体pUTA2复合启动子的下游 ,构建鸡痘病毒转移载体pUTA2 Gp10 5。将该重组质粒与鸡痘病毒 (FPV) 2 82E4株共转染鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,进行同源重组。通过 3次BrdU加压筛选 ,以PCR、RT PCR、IFA和Westernblot鉴定重组病毒。结果 从重组鸡痘病毒的基因组和总RNA中能扩增出大小为 6 5 3bp的目的基因 ;感染重组病毒的CEF细胞与特异性荧光抗体发生阳性反应 ;表达产物与人HIV- 2血清发生阳性反应 ,目的蛋白相对分子质量约为10 5 0 0 0。结论 成功获得 1株重组鸡痘病毒 ,可正确表达HIV 2Gp10 5基因。 相似文献