荷移光度法测定谷物中嘌呤含量的研究

探讨荷移光度法测定谷物嘌呤的方法。通过筛选不同荷移剂得到测定嘌呤的荷移剂以氯醌酸为宜,并对氯醌酸荷移光度法测定嘌呤的条件做了探究,所得的最优测定条件为：室温(20~30℃)、pH中性、以无水乙醇为介质、控制测定体系水分2.5%~3.0%、反应5~30 min,得到n_氯醌酸∶n_鸟嘌呤=1∶3的紫红色稳定荷移络合物;在λ_max=532nm下,鸟嘌呤和混合总嘌呤浓度在0 ~1×10_-4 mol.L_-1范围内符合朗伯-比耳定律且线性良好,其线性方程分别为ΔA_鸟嘌呤= 0.034c_鸟嘌呤+ 0.005 (R2 = 0.9952)、ΔA_总嘌呤= 0.0285c_总嘌呤+ 0.0071 (R2=0.992),其摩尔吸光系数分别为ε_鸟嘌呤=3.1×10₄ L.mol_-1.cm_-1、ε_总嘌呤=3.6×10₄ L.mol_-1.cm_-1,检出限分别为2×10_-6 mol.L_-1、9×10_-6 mol.L_-1。而对谷物实样的测得结果显示本试验所建立方法有良好的精密度(RSD 2.2%~7.3%)且与HPLC法(RSD 2.2% ~7.5%)相一致,回收率为83.8%~98.1%与HPLC法的91.8%相当,符合微量成分分析要求,且经F-检验和t-检验均表明本法与HPLC法无统计学上差异。因此,用氯醌酸荷移光度法测定谷物中的嘌呤含量可行。