反相高效液相色谱法快速测定乳铁蛋白含量

目的建立一种反相高效液相色谱法(RP-HPLC)快速测定乳铁蛋白在乳原料及乳制品中含量的方法。方法根据酪蛋白在等电点(p H 4.6)凝聚沉淀特点,采用RP-HPLC法,用p H4.6醋酸盐缓冲液溶解分离乳铁蛋白,用C18色谱柱快速分离,用流动相A为0.1%三氟乙酸水溶液,流动相B为含有0.09%(V:V)三氟乙酸的90%(V:V)乙腈水溶液,进行梯度洗脱,检测波长214 nm,流速0.7 m L/min。结果乳铁蛋白在10~500 mg/L之间呈现良好的线性,相关系数为0.9999,平均回收率为98.0%,RSD=0.8%(n=9)。结论该方法推广性高、快速,简便、准确,可用于乳铁蛋白原料、奶粉、牛奶及保健品等中乳铁蛋白的含量检测。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定保健食品中磷脂酰丝氨酸

目的 建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法检测保健食品中磷脂酰丝氨酸的含量。方法 将样品用氯仿+甲醇(9:1, V:V)提取液溶解定容后过膜, 采用高效液相色谱法(正相色谱柱, 蒸发光散射检测器)进行检测, 流动相为正己烷+异丙醇+水+乙酸+三乙胺(36:55:8:1.5:0.08, V:V:V:V:V), 外标法定量。结果 在40~ 1000 μg/mL的范围内磷脂酰丝氨酸浓度的自然对数与峰面积的自然对数线性关系良好, 相关系数为0.9991, 加标回收率为99.00%~100.15%, 相对标准偏差为0.3%~0.7%。结论 该方法操作简便、准确、重现性好, 适用于保健食品中磷脂酰丝氨酸含量的测定。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法快速测定益生菌粉中低聚果糖含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法,快速洗脱分离出蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖,测定益生菌粉中低聚果糖的含量。方法样品经过前处理,以乙腈和水为流动相,等度洗脱,经XAmide(4.6 mm×250 mm,5μm)中性酰胺色谱柱分离,采用蒸发激光检测器检测。结果蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖线性范围分别在0.2671~3.168 mg/m L、0.2429~2.8215 mg/m L、0.1617~3.544 mg/m L,线性相关系数r0.99。3种主要组成的回收率在97.0%~105.0%之间。结论该方法可有效分离出蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖,推广性高、快速、简便、准确,可用于益生菌粉中低聚果糖含量的测定。     

高效液相色谱法测定保健食品中β-葡聚糖

目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测保健食品中β-葡聚糖含量。方法称取样品适量,在酸性条件下于135℃用微波消解仪提取15 min,取出水解液,用氢氧化钠溶液调节pH至6.5±0.2,用水定容至100 mL容量瓶中,摇匀后过滤。采用高效液相色谱法检测,根据葡萄糖标准品的色谱峰面积进行定量。结果葡萄糖浓度在0.01~0.16 mg/mL的范围内与峰面积的线性良好,相关系数为0.9998。3水平不同浓度葡萄糖标准品添加的回收率为97.4%~98.6%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.4%~0.9%。结论该方法操作简便、准确、重现性好,适用于保健食品中β-葡聚糖含量的快速测定。     

多种蜂胶中总黄酮检测方法的适用性研究

目的通过3种分光光度法之间差异的比较和适用性考量,筛选出适合检测蜂胶中总黄酮含量的分光光度法。方法采用同批次样品,对蜂胶(国产蜂胶和巴西绿蜂胶)中总黄酮检测方法进行回收率和含量测定,并对结果进行分析。结果巴西绿蜂胶粉3种方法的检测结果为4.99~9.34 g/100 g;国产蜂胶粉3种方法的检测结果为7.82~17.97 g/100 g,其RSD为24.2%~31.2%;可见3种方法测定结果偏差较大。结论 GB/T20574-2006的方法最适合蜂胶中总黄酮的检测。     

柱前在线衍生-反相高效液相色谱法测定羊胎盘

目的：建立一种采用反相高效液相色谱法测定羊胎盘枸杞胶囊中16种氨基酸的含量。方法：样品中的蛋白质在6mol/L盐酸溶液中水解为氨基酸,其中一级氨基酸用邻苯二甲醛(OPA)、二级氨基酸用9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC)进行柱前在线衍生;用Agilent Hypersil AA-ODS柱(200mm×2.1mm,5μm)分离;用流动相(0.16%醋酸钠)进行梯度洗脱;经荧光检测器(FLD)检测(激发波长：340nm,发射波长：450nm;15min时,激发波长：266nm,发射波长：305nm)。结果：16种氨基酸在5pmol/ul～250pmol/ul浓度范围内呈现良好的线性关系(r:0.99959～1.00000)(n=5),平均加标回收率(n=9)为91.6%～104.1%,相对标准偏差(RSD)为0.9%～3.7%,最低检测限为0.4pmol～1.2pmol。结论：该方法灵敏度高,具有良好的精密度与准确度,可以有效地控制产品质量。     

高效液相色谱法测定保健食品中三氯蔗糖的含量

目的建立一种保健食品中三氯蔗糖含量测定的高效液相色谱检测法。方法样品采用Rad pak C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行分离,以1.0 m L/min乙腈:水(V:V=15:85)为流动相,最后用高效液相色谱法(HPLC)-示差折光仪为检测器进行测定,外标法定量分析。结果高效液相色谱法在0.482~2.892 mg/m L浓度范围,三氯蔗糖的浓度和峰面积的线性良好,相关系数为0.999(r0.99),该方法的检出限和定量限分别为19.58 mg/g和65.27 mg/g,在不同的添加水平下,该方法的回收率范围为95.0%~95.6%,相对标准偏差为0.3%(n=9)。结论高效液相色谱法灵敏度、准确度均较高,适用于保健食品中三氯蔗糖的含量测定。     

反相高效液相色谱法快速测定复方维生素片中微囊化β-胡萝卜素

目的建立一种快速测定复方维生素片中微囊化β-胡萝卜素的反相高效液相色谱法。方法样品经0.1 mol/L的碳酸钠溶液破坏微囊,甲醇-乙腈(7∶3,V/V)混合溶液超声提取,采用Agilent SB-C_8柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离,流动相为甲醇-乙腈(9∶1,V/V),检测波长为448 nm。结果β-胡萝卜素在本试验色谱条件下能完全分离,其线性范围为0.41~6.20μg/ml,平均回收率99.4%~103.3%,RSD2.0%。结论该方法操作简便,能测定复方维生素片中微囊化β-胡萝卜素,精密度和回收率高,重复性好,结果符合要求。     

反相高效液相色谱法测定维生素K2中 七烯甲萘醌的含量

目的建立维生素K2产品中七烯甲萘醌(MK-7)的反相高效液相色谱定量检测的方法。方法采用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为50%甲醇/水(含0.1%乙酸)(95:5=V:V),50%异丙烷。流速为等速1.0 m L/min,检测波长270 nm,柱温40℃。结果 MK-7在浓度0.355~2.132 mg/m L的范围内具有良好的线性关系,相关系数在0.9999以上。重复性实验中相对标准偏差为0.41%,加标回收率为98.15%。结论此方法准确性高、重现性好、操作简单,可用于维生素K2中MK-7含量测定。     

羰基价测定影响因素考察

目的对羰基价测定影响因素进行考察。方法采用GB/T 5009.37-2003食用植物油卫生标准的分析方法,采用2,4-二硝基苯肼比色法,分别考察测定结果的精密度,显色液稳定性,不同浓度的三氯乙酸溶液、氢氧化钾溶液、2,4-二硝基苯肼溶液、无醛乙醇以及不同的水浴时间、温度对羰基价测定结果的影响。结果该方法的精密度为0.9%~2.4%,显色液在0~90 min内的吸光度呈较快的下降趋势,羰基价的测定结果会随三氯乙酸浓度(3.0~5.0 g/100 mL)、2,4-二硝基苯肼浓度(40~60 mg/100 mL)、水浴时间(20~40 min)、水浴温度(50~70℃)的增大而增大,会随氢氧化钾浓度(3.0~5.0g/100 mL)的增大而降低、90%无醛乙醇会使显色液发生浑浊而无法测定。结论羰基价的检测应严格按照GB/T5009.37-2003中规定的条件进行测定。