大肠菌群一步发酵法检测的研究

本实验以美国食品与药品管理局(FDA)的初发酵培养基LST以及从国标(GB)乳糖胆盐初发酵培养基中优选出的A3培养基作大肠菌群检测的初发酵基础培养基。首先在LST和A3中分别添加几种不同浓度的革兰氏阳性菌抑制剂进行大肠菌群检测。结果表明,革兰氏阳性菌抑制剂对革兰氏阳性菌和大肠菌群均有抑制,不利于大肠菌群检出。然后,在A3培养基中分别添加大肠杆菌以及枯草杆菌等七种革兰氏阳性菌进行大肠菌群检测。在210支混合发酵管中,结果吻合率为92.42%,假阳性和假阴性分别为2.84%、4.74%。T检验法表明,在初发酵中,革兰氏阳性菌的存在对大肠菌群检测没有明显影响。接着,本实验又在A3培养基中分别添加产生假阳性的革兰氏阳性菌进行纯种发酵检测。在120支假阳性纯种发酵管中,均不会产生阳性反应。大量镜检实验也充分显示,发酵液中主要是革兰氏阴性菌。综上结果说明,A3培养基是一种适宜大肠菌群生长,抑制革兰氏阳性菌生长的初发酵基础培养基,能在短期内使发酵管产气的菌群基本就是大肠菌群。因此,在大肠菌群检测中只需进行一步发酵法检验。     

大肠菌群测定初发酵培养基的改进

用我国国家标准乳糖胆盐培养基(GB4789.3-94,简称GB)、日本卫生协会煌绿乳糖胆盐肉汤培养基(简称BGLB)和美国食品与药品管理局(FoodandDrugAdministration,简称FDA)月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤培养基(简称LST)对大肠杆菌菌液以及蔬菜中的大肠菌群进行检测对比试验。结果表明:LST培养基对大肠菌群的检出率比BGLB培养基和GB培养基分别高35.93%、67.71%。以LST培养基为基础并优选出A3培养基(LST+0.2%吐温),扩大实验表明:A3培养基对大肠菌群的检出率比GB培养基和LST培养基分别高出577.12%和143.72%。