不同保藏方式南美白对虾的电子鼻分析

基于Alpha MOS公司生产的FOX4000型电子鼻,对不同贮藏务件下和不同贮藏时间的南美白对虾样品进行分析,并结合感官评定与微生物计数培养分析,旨在建立一种基于电子鼻对虾质量评价的方法,并对不同保藏方法的南美白对虾的气味进行研究.三种保藏方法是:组1:直接放入4℃冰箱中,即非气调保藏;组2:经40%CO2 60%N,气调包装,4℃冰箱保藏;组3:经60%CO2 15%N2 25%O2气调包装,4℃冰箱保藏.结果显示,三组对虾样品感官得分逐渐下降;pH先下降后上升;细菌总数逐渐增多.三种不同保藏方式的对虾不同保藏时间气味有很大的差别;随着贮藏时间的延长,传感器的响应强度逐渐增强,且不同贮藏时间的样品可以相互区分;组3条件下气调气味变化最为缓慢;并且气调保藏约延长货架期6d.电子鼻可以用于不同保藏方式南美白对虾气味的检测.     

食品中单核细胞增生性李斯特菌的快速分离鉴定

单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,简称单增李斯特菌)是一种重要的食源性致病菌,能引起人畜共患李斯杆菌病。本文采用两种不同的增菌分离方法从散装牛奶和猪肉中共分离得到8株单增李斯特菌。通过革兰氏染色、生化鉴定、PCR扩增hlyA基因、16SrDNA测序、血清分型等一系列实验对可疑菌株进行分析鉴定。综合实验结果和其他单增李斯特菌分离标准,探讨开发了一种快速分离鉴定单增李斯特菌的方法,该方法可在4～5d内完成单增李斯特菌的分离检测过程。     

马槟榔甜蛋白基因(MabinlinⅡ)的密码子优化及其在大肠杆菌中的表达

本研究根据大肠杆菌密码子的偏好性,对马槟榔甜蛋白基因MabinlinⅡ(A链+B链)的密码子进行优化,并将优化后的马槟榔甜蛋白基因命名为MabinlinⅡ(AB)Plus。将MabinlinⅡ(AB)Plus基因与大肠杆菌表达载体pET-28a(+)片段连接,构建重组表达载体pET-28a(+)-MabinlinⅡ(AB)Plus,进而转化到大肠杆菌宿主表达菌株BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达。结果表明,密码子优化后的基因MabinlinⅡ(AB)Plus在大肠杆菌中最佳表达条件为:最适IPTG浓度1.4 mmol/L,最佳诱导剂温度为37℃,最适菌株起始生长量OD₆₀₀为0.7,最佳诱导时间8 h。在最佳诱导表达条件下,目的蛋白表达量占菌体总蛋白约33.0%,与优化前约有提高7%。目的蛋白的上清液经过亲和纯化,在19 kDa处有单一的目的条带。经过感官评定,目的蛋白的甜度约为2%标准蔗糖溶液的400倍。这为研发以马槟榔甜蛋白为基础的新型甜味剂提供了科学的理论依据。     

基于特异性基因的副溶血性弧菌快速分离鉴定

副溶血性弧茵(Vibrio parahaemolyticus)是海洋环境中常见的食源性致病菌.采用自行设计的改良初筛方案结合tlh、toxR这2种特异性基因的2次筛选开发了一种副溶血性狐菌的快速分离鉴定方法.应用该法从海水、海泥及3种海产品中分离得到了19株副溶血性孤菌,再经16S rDNA测序对分离鉴定结果的特异性进...     

致病性与非致病性副溶血性弧菌在不同温度和接触材料表面生物被膜形成情况分析

采用结晶紫染色法分析了致病性(22株)与非致病性(17株)副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)在不同温度(4,10,15,25,37℃)及不同接触材料(聚苯乙烯、玻璃和不锈钢)表面生物被膜的形成情况。结果表明,VP生物被膜形成能力在高温条件下(25,37℃)明显强于低温条件(4~15℃),25℃是生物被膜形成的最适温度。对比3种常见的接触材料,VP在玻璃表面生物被膜形成能力最强,聚苯乙烯表面次之,不锈钢表面最弱。通过变异系数分析可知,温度对VP生物被膜形成能力影响最大,其次为接触材料。进一步分析发现,致病性菌株生物被膜形成能力显著强于非致病性菌株(p0.05)。研究表明:致病性与非致病性VP在不同温度及接触材料表面生物被膜形成能力存在差异,建议今后在食品加工过程中,可通过控温或改换接触材料,进而有效控制VP生物被膜导致的危害。     

常见食源性致病菌CRISPR系统结构与功能研究进展

近年发现细菌和古细菌中广泛存在规律成簇间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)系统,该系统能够有效地防御噬菌体等外源基因元件的入侵,限制基因的水平转移。而在食源性致病菌中CRISPR系统除了免疫防御功能以外,还可能具有调节细菌毒力等的其他功能。并且食源性致病菌的CRISPR系统呈现出的多样性在不同菌株之间存在差异,这种差异为食源性致病菌的遗传进化、分子分型提供了更为可靠的依据。因此,近年来针对食源性致病菌中CRISPR系统结构与功能的研究逐渐成为热点。为了进一步探究CRISPR系统在食源性致病菌中的作用机制与应用前景,本文综述了几种常见的食源性致病菌CRISPR系统的基本结构及相关功能的研究进展。     

三文鱼气调保鲜技术的研究进展

三文鱼不仅是补充人体营养物质的理想食物来源,而且还具有良好的保健作用。本文主要介绍了三文鱼气调保鲜技术的研究进展,指出了三文鱼气调保鲜技术的发展趋势,即单一采用气调保鲜技术只能有限地延长三文鱼的货架期,而气调保鲜技术与酸浸、盐渍、烟熏、保鲜剂和抑菌剂等结合使用可以更好地延长三文鱼的货架期,这将是气调保鲜技术发展的一个趋势。气调包装抑制了好氧菌的生长,气调贮藏中的特定腐败菌为发光磷杆菌、乳酸菌等。通过腐败菌生长建立的货架期预测模型可用于预报三文鱼的货架期,从而建立起一种准确及时的食品质量安全评估方法。     

单增李斯特菌WaX12及其sigB缺失突变株在不同pH下生长动力学的比较

为了探究σ~B因子对单增李斯特菌(LM)的生长影响,比较了LM-WaX12及其sigma B缺失突变株在不同pH值下生长动力学的差异。作者运用重叠延伸PCR(SOE-PCR)和同源重组的方法构建缺失SigB基因的LM突变株WaX12-△sigB;利用sigB外围引物扩增其两侧片段鉴定突变株,并且通过修正的Logistic模型拟合两个菌株在不同酸碱度下(p H 5~9)的生长曲线,分析各生长参数之间的差异性。结果表明,单增李斯特菌sigB缺失突变株构建成功;WaX12-△sigB和WaX12在p H 5的环境下最大比生长速率μ_(max)、延滞期λ与最大菌浓MPD-OD均存在显著性差异(P0.05),而在中性和碱性环境下二者无明显差异。     

副溶血性弧菌16S rRNA基因序列变异规律分析

通过对副溶血性弧菌16S r RNA基因序列进行深度分析,研究其序列变异特点,为开发新的分型溯源靶点奠定基础。对111株分离自生鲜水产品的副溶血性弧菌16S r RNA基因测序,与Gen Bank中已有的副溶血性弧菌16S r RNA基因标准序列比对分析,对变异度比较大的序列建立了系统发育树,深入分析了基因的变异规律,并使用ERIC-PCR方法加以验证。不同副溶血性弧菌菌株16S r RNA基因变异主要集中在可变区V1和V2区,50~270 bp的区域内有38个碱基的相似度小于30%,103个碱基的相似度在30%~100%。另外,在V3区和V8区也各有1个碱基有比较明显的差异。副溶血性弧菌16S r RNA基因序列具有一定的变异性,该结果为副溶血性弧菌菌株分型溯源分析提供新的靶点奠定研究基础,同时为其微进化研究奠定理论基础。     

南美白对虾主要过敏原原肌球蛋白的低过敏性处理方法研究

以南美白对虾原肌球蛋白(Tropomyosin,Tm)为研究对象,采用酶解法、超声结合酶解法消减3种虾制品中的Tm。首先,以菠萝蛋白酶水解富集的Tm样品通过优化酶活与底物质量比、反应时间和反应温度,建立了能有效消减Tm的酶解方法;同时对比了酶解、超声结合酶解法分别对虾仁、蝴蝶虾仁和虾糜3种制品中的Tm过敏原性变化情况。Tm致敏动物模型的抗血清ELISA结果显示,单纯酶解和超声结合酶解处理的虾仁其过敏原性无显著性差异(P0.05);经超声结合菠萝蛋白酶酶解处理后的蝴蝶虾仁样品其过敏原性降低了21.05%;而虾糜样品中,单纯的酶解或超声结合酶解法与对照相比均有显著性差异,其过敏原性分别减少了30.70%和33.33%。综上所述,作者建立的酶解法可有效消减Tm的过敏原性,该酶解法以及超声结合酶解法在低过敏原性蝴蝶虾仁和虾糜制品的生产领域具有较高的应用可行性。