高产胞外多糖沙棘根瘤内生细菌的筛选、鉴定及其发酵条件优化

目的:从6株产胞外多糖的沙棘根瘤内生细菌中,筛选出高产胞外多糖的菌株,并对其进行鉴定和发酵条件优化。方法:利用苯酚-硫酸法联合DNS法测定菌株胞外多糖产量,筛选高产胞外多糖菌株;利用形态学观察、生理生化特征及16S rRNA基因序列分析法对高产胞外多糖菌株进行鉴定;利用单因素实验法优化产多糖的发酵培养基与发酵条件,并利用正交实验法进一步优化培养基中蔗糖、KNO₃、KH₂PO₄的最适添加量。结果:筛选得到一株高产胞外多糖菌株TT207,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。经条件优化,确定其高产胞外多糖的最优培养基组分为蔗糖50 g/L,KNO₃ 10 g/L,KH₂PO₄ 8 g/L;最佳发酵条件为:培养时间48 h,培养温度34℃,初始pH6.5,接种量4%,装液量70 mL/250 mL,摇床转速140 r/min。利用优化后的发酵条件,菌株胞外多糖产量提高了6.04倍。结论:高产胞外多糖菌株枯草芽孢杆菌TT207在最优发酵条件下,胞外多糖产量达到12.39 mg/mL,是一株具有开发潜力的胞外多糖生产菌株。     

几种植物淀粉合成酶的生物信息学分析

采用生物信息学方法比对分析了马铃薯、红薯、小麦、高粱、南瓜、水稻等6种植物的淀粉合成酶(SS)的核苷酸和氨基酸序列,对其甲基化位点、组成成分、理化性质、疏水性/亲水性、跨膜结构域、蛋白质二级结构、功能结构域进行预测和分析。结果表明:红薯、小麦、高粱和水稻都含有甲基化位点,马铃薯和南瓜不含甲基化位点。SS的平均全长为1 847 bp,开放阅读框的长度约为877 bp,起始密码子为ATG,终止密码子有3种;开放阅读框所编码的氨基酸残基平均数286,平均相对分子质量为31 915.88;平均等电点为8.264 5,中性溶液中平均带电荷为-0.598 1;平均亲水氨基酸63个、疏水氨基酸102个,SS为疏水性蛋白。6种植物的SS含有2个跨膜结构,其二级结构以无规则卷曲和延伸链为主要构件。通过进化树分析淀粉合成酶,小麦和高梁进化程度相似,和南瓜的进化相距较远。     

乙醇-硫酸铵双水相萃取紫色红曲菌发酵液中的红曲色素及其稳定性分析（英文）

建立一种采取乙醇-硫酸铵双水相体系,从紫色红曲菌YY1-3菌株发酵液中简单、高效萃取红曲色素(Monascus pigments,MPs)的方法,利用薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)分析提取液的色素成分,并考察了该菌株产红曲色素的稳定性。结果表明:当萃取体系中添加质量分数16%的乙醇和28%的硫酸铵时,MPs的分配系数与回收率达到最大,分别为171.91和98.13%;当上相萃取液-乙醇体积比为1∶0.5时,可有效分离回收上相中的硫酸铵;TLC分析结果表明,萃取液中有6种主要色素组分,其中以红曲红和红曲黄色素为主;色素稳定性实验结果表明,在避光、pH 4～8、25～65℃以及常规金属离子和食品添加剂溶液中,该菌株所产的MPs具有良好的稳定性。     

一株产蓝色素放线菌的分离、鉴定及其色素稳定性初步研究

为了研究一株从盐碱土中分离的产蓝色素放线菌菌株DA04417的分类地位及其色素稳定性。通过形态学、生理生化特征、16S rRNA基因序列分析对该菌株进行鉴定,并对其色素稳定性进行初步研究。结果表明菌株DA04417初步鉴定为灰红链霉菌(Streptomyces griseoruber)。其产色素最大吸收峰为580 nm,色素在p H 3~11区域内增色作用明显;自然光和紫外光对色素都有一定的消色作用,但影响不大;色素在4~80℃内稳定;色素对还原剂Na2SO3稳定,而氧化剂H2O2对色素有消色作用;色素对Na Cl、蔗糖稳定,柠檬酸钠对色素有明显消色作用;金属离子对色素都有不同程度的消色作用。放线菌DA04417是一株具有开发前景和应用潜力的产蓝色素菌株。      

1 株类胡萝卜素产生菌的鉴定及其发酵培养基的优化

利用形态学、生理生化和rDNA-ITS序列分析相结合的方法鉴定1 株产类胡萝卜素的菌株K-1,采用比色法测定其生长和所产类胡萝卜素的稳定性,借助单因素试验和正交试验优化K-1菌株的发酵条件。结果表明,菌株K-1为胶红酵母（Rhodotorula mucilaginosa）,最适生长温度30?℃,生长pH值范围2～7;含有红酵母烯,所产色素的基本稳定性良好,但高温（＞60?℃）、强光和添加氧化剂H2O2可使其稳定性下降。菌株K-1产类胡萝卜素的最适发酵条件为20?g/L葡萄糖、20?g/L?(NH4)2SO4、2?g/L无水CaCl2、5?g/L柠檬酸三钠（培养温度30?℃、接种量10%、摇床转速150?r/min、装瓶量50?mL/250?mL、初始pH?5.5、培养5?d）;优化条件下类胡萝卜素产量达（180.14±2.45）μg/g（干菌体）。研究表明,菌株K-1具有高产类胡萝卜素的潜能,色素稳定性良好,可为微生物类胡萝卜素的发酵生产提供菌种资源。     

油橄榄叶提取物的抑菌活性研究

以牛津杯扩散法考察油橄榄叶提取物(OLE)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等8种致病菌的抑菌活性,用稀释法分析OLE对8种细菌生长的影响,并探究最低抑菌质量浓度(MIC)和最低杀菌质量浓度(MBC)。结果表明:以盐酸小檗碱作为对照,OLE对蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、抗四环素大肠杆菌的抑菌作用优于盐酸小檗碱; OLE对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌作用较强(MIC 1 mg/mL,MBC 2 mg/mL)。20 mg/mL的OLE对大肠杆菌的抑制作用最强,为极度敏感(大肠杆菌的d=(25. 07±3. 02) mm,抗四环素大肠杆菌的d=(24. 89±1. 58) mm);葡萄球菌次之(表皮葡萄球菌的d=(20. 11±1. 02) mm,金黄色葡萄球菌的d=(21. 35±2. 06) mm,金黄色葡萄球菌(SH7) d=(20. 01±1. 21) mm);而芽孢杆菌处于中度敏感状态。OLE除对铜绿假单胞菌的对数生长期无明显影响外,对其余7种细菌的对数生长期均有延缓作用。OLE具有较强的抑菌活性,可作为一种绿色安全的植物源抑菌制剂。