重组Flag-pA-Tn5蛋白的原核表达及酶活性鉴定

目的 构建Flag-葡萄球菌蛋白A(staphylococcal protein A,SPA)与转座酶Tn5基因的重组原核表达质粒p TXB1-Flag-pA-Tn5,在大肠埃希菌中表达、纯化重组Flag-pA-Tn5蛋白,并检测其转座酶活性。方法 合成Flag-pA基因的DNA编码序列,PCR扩增后插入原核表达载体pTXB1-Tn5,构建重组原核表达质粒pTXB1-Flag-pA-Tn5;转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达带有Flag标签的pA-Tn5蛋白,并经几丁质树脂亲和纯化后透析复性;将Flag-p A-Tn5蛋白与含测序引物接头的转座子DNA片段组装成转座体,取不同稀释比例的转座体与人外周血白细胞基因组DNA共孵育,以DNA孵育产物为模板、测序引物进行PCR扩增,鉴定Flag-pA-Tn5转座酶活性。结果 重组原核表达质粒pTXB1-Flag-pA-Tn5经双酶切和测序证明构建正确;表达的重组蛋白产量为211.1μg/mL,能够被几丁质树脂亲和纯化,纯度为84%;Flag-pA-Tn5蛋白与转座子DNA片段组装后,能有效切割人外周血白细胞基因组DNA,并连接测...     

碳纤维

<正> 1.碳纤维的制造方法(1)采用沥青作为原料采用沥青作为原料的制作方法有低杨氏模量碳纤维和高杨氏模量碳纤维两种类型。前者是采用性质相同的沥青纺丝的,而后者     

水溶性偶氦引发剂引发丙烯酸钠的反相乳液聚合反应

采用水溶性偶氮引发荆V50和NaHSO3组成的复合引发剂,通过反相乳液聚合制备了相对分子质量高的聚丙烯酸钠.研究了引发剂种类及用量、乳化剂的HLB值及其用量、反应温度等因素对聚丙烯酸钠相对分子质量的影响规律.并采用正交优化方法对聚丙烯酸钠的聚合反应工艺进行优化研究.结果表明:复合引发剂V50/NaHSO3效果优于APS/NaHSO3.最佳聚合工艺条件为复合乳化荆的用量为9%(占油相的质量百分数)、其HLB值为5.7、单体中和度为90%、引发剂用量为2.0%(占单体的质量百分数)、反应温度为40.C.在最佳反应条件下,得到的聚合物相对分子质量可达到2.1×107,溶解时间23 min(0.3 g/100 g H2O245℃).     

氧氟沙星与β-环糊精之间形成包合物的研究

氧氟沙星是全合成的第三代喹诺酮类广谱高效抗菌药，用荧光光谱法研究了氧氟沙星与β-环糊精之间的包合作用，测得了包合常数，结果表明β-环糊精与氧氟沙星能很好包合。该研究为进一步应用β-环糊精改性氧氟沙星提供了依据。     

4-(N'-甲基-1-哌嗪基)-N-甲基-1,8-萘二甲酰烯丙基氯季铵盐的合成与光学性质

以4-Br-1,8-萘酐和甲胺为原料,经过酰胺化、胺化、烷基化、季铵化四步反应,得到一种水溶性荧光单体4-(N'-甲基-1-哌嗪基)-N-甲基-1,8-綦二甲酰烯丙基氯季铵盐.采用红外光谱、质谱、核磁共振氢谱及元素分析等测试技术对产物进行了结构表征,并对其紫外光谱、荧光光谱等光学性质进行了初步的研究.     

长春新碱在β-环糊精修饰电极上的电化学行为

采用循环伏安法研究了长春新碱(VCR)在β-环糊精(β-CD)修饰金电极表面上的电化学行为,探讨了扫速、pH值和温度对表面包络反应的影响。实验结果表明:VCR的电极过程具有吸附性和不可逆性;在β-CD修饰电极上VCR的浓度与峰电流之间的关系符合Langmiur单分子层吸附等温方程;VCR与β-CD能有效包络,其包络常数K=4.6×103L/mol,速率常数k°=42.89 s-1。     

气候变化趋势对海盐生产的影响及对策

文章根据天津长芦海晶集团有限公司气象台的气象资料，将1954年～2003年50年的温度、降水和蒸发量进行了统计分析：塘沽地区气候趋向变暖，特别是近10年变化明显，气温升高明显，降水量偏少；同时，对海盐生产充分利用气候资源、应对气候变化进行了分析。     

水溶性偶氮引发剂引发丙烯酸钠的反相乳液聚合反应

采用水溶性偶氮引发剂V50和NaHSO3组成的复合引发剂,通过反相乳液聚合制备了相对分子质量高的聚丙烯酸钠。研究了引发剂种类及用量、乳化剂的HLB值及其用量、反应温度等因素对聚丙烯酸钠相对分子质量的影响规律。并采用正交优化方法对聚丙烯酸钠的聚合反应工艺进行优化研究。结果表明:复合引发剂V50/NaHS03效果优于APS/NaHSO3。最佳聚合工艺条件为复合乳化剂的用量为9%(占油相的质量百分数)、其HLB值为5.7、单体中和度为90%、引发剂用量为2.0%(占单体的质量百分数)、反应温度为40°C。在最佳反应条件下,得到的聚合物相对分子质量可达到2.1×107,溶解时间23 min(0.3 g/100 g H2O,45°C)。     

反相乳液法合成高分子量聚丙烯酸钠

以Span-85和Span-60作为复合乳化剂,采用反相乳液聚合法合成了高分子量聚丙烯酸钠。研究了复合乳化剂的配比对聚合体系稳定性的影响以及中和度、过硫酸盐-亚硫酸氢钠引发剂和不同溶剂对聚合物性能的影响。结果表明,最佳的实验条件为：中和度95％,乳化剂用量10％（油相）,其中Span-60占乳化剂用量的95％,引发剂用量（以单体质量分数计）分别为K2S2O8 0．06％,NaHSO3 0．02％,选用环己烷作溶剂。在最佳实验条件下,合成聚合物相对分子质量达1．24×10^7,且水溶性能优于其他聚合条件下所得产品。