发酵酶解法提取紫菜蛋白多肽及其特性研究

利用纳豆芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌对紫菜进行发酵,并结合木瓜蛋白酶酶解的方法提取紫菜蛋白多肽,考察了发酵酶解法对蛋白提取率的影响。结果发现,以未加热处理的紫菜为原料,纳豆芽孢杆菌接种量4%,在30℃下发酵24 h,再利用木瓜蛋白酶(1 mg/mL)酶解3 h后,紫菜蛋白提取率为82%,而利用接种量2%的枯草芽孢杆菌时蛋白提取率可达89%。根据紫菜发酵酶解物的性质分析结果,发现提取物的氨基酸组成与紫菜相同,蛋白溶解性不受pH影响,在pH 3.0下乳化活性最高,而在pH 9.0下乳化稳定性最好。     

鱼皮胶原肽对人皮肤角质细胞生长的影响

本文考察了鲨鱼皮胶原酶解物(SH)、罗非鱼皮胶原酶解物(TH)及其分离组分对人皮肤角质细胞(HaCat细胞)生长的影响。结果发现,在细胞生长对数期阶段,添加0.05mg/mL或0.20mg/mL的SH可以明显促进HaCat细胞增殖,然而当SH的浓度提高至1.00mg/mL时HaCat细胞却没有出现显著的增殖。虽然TH也可以促进HaCat细胞增殖,但TH浓度对细胞增殖却没有显著的影响。另一方面,不管是鲨鱼皮胶原酶解物还是罗非鱼皮胶原酶解物,利用SephadexG-15凝胶层析分离获得的组分比单组分Gly-Tyr二肽和酪氨酸具有更好的促进细胞增殖能力,在抑制细胞的MDA生成和提高细胞的SOD活力甚至优于谷胱甘肽。这些结果表明,鱼皮胶原制备的酶解物通过凝胶层析分离的组分拥有优越的促进人皮肤角质细胞生长的能力,作为抗氧化肽具有替代谷胱甘肽应用在化妆品的潜力。     

脱色工艺对鱼皮胶原肽品质的影响

利用复合酶通过酶解方法制备罗非鱼皮胶原肽,考察活性炭、大孔吸附树脂对胶原肽的脱色效果。以脱色率和肽损失率为指标,通过正交试验进行工艺优化,结果表明:在pH 4.5、活性炭添加量2%(m/V)、脱色时间60min、蛋白浓度50mg/mL的条件下,活性炭脱色效果最佳,脱色率可达92.66%,肽损失率为11.23%;而大孔吸附树脂在最佳脱色条件下,脱色率只有83.02%,肽损失率却高达30.77%,脱色效果明显不及活性炭。根据胶原肽分子量分布和氨基酸组成分析结果发现:经活性炭、大孔吸附树脂脱色后,鱼皮胶原肽中分子量500~1 000Da组分比例明显减少,His、Tyr和Phe等氨基酸含量显著下降。     

鲨鱼皮胶原与罗非鱼皮胶原的理化性质及酶解特性研究

为了系统比较深海鱼和淡水鱼胶原的差异,利用酸法提取鲨鱼皮胶原和罗非鱼皮胶原,并对它们的理化性质和酶解特性进行了考察。氨基酸组成分析表明,鲨鱼皮胶原中异亮氨酸含量大约是罗非鱼皮胶原的2倍,但脯氨酸含量较少。鲨鱼皮胶原α肽链和β肽链的分子量,以及胶原热变性温度都低于罗非鱼皮胶原,但在紫外光谱和红外光谱中没有发现明显的差异。另一方面,电泳图谱和液相图谱都表明,鲨鱼皮胶原和罗非鱼皮胶原容易被胶原酶和胰蛋白酶酶解,不易被木瓜蛋白酶酶解。在胶原酶与底物质量比为0.05%,pH8.0和50℃的酶解条件下,经过240min酶解,鲨鱼皮胶原肽中小于1000u的肽含量达到23%,而罗非鱼胶原肽中却只有17%。