昆明假单胞菌HL22-2海藻糖合酶基因的克隆、表达及酶学性质研究

采用热不对称交错聚合酶链式反应（Tail-PCR）克隆云南磷矿来源昆明假单胞菌（Pseudomonas kunmingensis）HL22-2的海藻糖合酶（TreS）基因HL22-2TreS,将该基因与表达载体pETM3C连接后在大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）pLysS中进行异源表达,通过Ni-NTA柱纯化重组酶HL22-2TreS,并对其酶学特性进行分析。结果表明,HL22-2TreS基因全长3 336 bp,编码1 111个氨基酸,氨基酸序列与Genbank数据库中相关的海藻糖合酶具有极高的相似性。重组酶HL22-2TreS的分子质量约126 kDa,该酶的最适反应温度和pH值分别为40 ℃和7.0,在温度20～50 ℃及pH值6.0～9.0条件下比较稳定,Cu2+、Hg2+、Ba2+及Al3+对海藻糖合酶的活力有强烈的抑制效果。HL22-2TreS基因对麦芽糖和海藻糖的米氏常数（Km）分别为20.6 mmol/L和87.5 mmol/L,对麦芽糖具有更高的亲和性,更容易将麦芽糖转化成海藻糖。     

高海拔寒冷地区隧道修筑技术

介绍青海省大坂山公路隧道在修筑中解决防寒保温、防冻融、防冻胀等技术问题的措施。     

电气化铁路护坡上桩板式挡土墙桩孔爆破技术

主要阐述京秦提速改造工程桩板式挡土墙在电气化接触网密布、既有线行车频繁、紧邻村庄民房的条件下，解决不同岩石桩孔爆破的炮眼布置、药量控制、网路连接及覆盖防护等技术措施。     

离子膜电解槽的管理工作

介绍了金川集团股份有限公司化工厂根据离子膜电解装置的管理经验提出的一套有效、系统的离子膜电解槽管理方式。     

铁路既有线护坡上桩板式挡土墙先成桩法施工技术

主要阐述京秦提速改造工程桩板式挡土墙在坡度较陡，全面开挖较易坍方的条件下，采用先成桩法施工，进行护壁装修、护壁拆除等工艺，保证桩面平整光滑的技术措施。