DSC法检测抗冻蛋白的热滞活性的研究

以胡萝卜抗冻蛋白(DcAFP)为研究对象,结合相关文献报道,应用差示扫描量热法(DSC)研究其抗冻活性,对可能影响到其抗冻活性的因素做了全面的考察,以建立一个有效测定热滞活性的标准方法。实验结果表明,差示扫描量热法测定DcAFP的热滞活性具有较高的稳定性(利用差示扫描量法每隔一段时间测定相同的样品时,所得的抗冻蛋白的抗冻活性在统计学上没有显著差异,说明该方法的稳定性好),重复性(相对标准偏差(RSD)均小于0.4%,0.137%RSD0.369%)和精密度(RSD=1.42%)。     

白斑狗鱼鱼皮中抗冻蛋白的分离纯化

以白斑狗鱼为研究对象,选取鱼皮组织为试验材料,通过单因素及响应面试验对鱼皮抗冻蛋白提取工艺条件进行优化。以抗冻蛋白的热滞活性（THA）作为考察指标,对提取温度、提取液的pH值、提取时间及料液比进行探讨。结果表明,在提取温度8 ℃、提取液pH 值为8.4、提取时间2 h,料液比1∶3.8（g∶mL）的工艺条件下,模型预测的热滞活性为0.072 0 ℃。经验证试验,发现其热滞活性为（0.069 0±0.002 4） ℃,试验值与预测值差异较小,表明模型具有一定可靠性。通过柱层析对白斑狗鱼鱼皮抗冻蛋白进行分离纯化,纯化后的抗冻蛋白达到电泳级,且其分子质量约为6 400 u,热滞活性大约为（0.050 2±0.002 2） ℃。     

花芸豆铁蛋白的分离纯化

为了从花芸豆中获取纯化的植物铁蛋白,试验利用盐析及柱层析对花芸豆中的铁蛋白进行分离纯化。研究表明,铁蛋白提取的最佳工艺条件为:提取温度53.79℃,样液p H值为7.23,氯化镁浓度511.15mmol/L,柠檬酸三钠浓度为685.24 mmol/L。该条件下模型预测花芸豆中铁蛋白的含量为4.40 mg/g,实际试验值为(4.27±0.09)mg/g。经DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱和Sephacryl S-500分子筛柱纯化得到的电泳纯铁蛋白的相对分子质量为560 000,且只含有1种亚基,其相对分子质量为27 000。通过Western-Blot法对纯化所得的花芸豆蛋白质进行试验验证,结果确定该蛋白质为铁蛋白。     

蛋白质氧化对乳清分离蛋白功能性质的影响

为了进一步研究蛋白质氧化对乳清分离蛋白(WPI)功能性质及流变学性质的影响,试验采用两种不同浓度的氧化系统H2O2(1 mmoL/L~20 mmoL/L)和FeCl3浓度(0.1 mmoL/L~2 mmoL/L)对WPI分别氧化1 h、3 h、5 h,测定其性质。结果表明:20 mmoL/L的H2O2氧化WPI 5 h,其乳化活性下降了50%以上;1 mmoL/L FeCl3氧化WPI 3 h,其凝胶硬度降低了94.5%;20 mmoL/L H2O2与1mmoL/L FeCl3氧化WPI 3 h,其弹性从0.976下降到0.713和0.721,分别降低了26.9%和26.1%;当H2O2浓度20 mmoL/L时,弹性模量从8154 Pa降到5399 Pa,复合模量从10890 Pa降到6653 Pa,分别降低了33.79%和38.91%;当FeCl3浓度为1 mmoL/L时,弹性模量从8154 Pa降到4935 Pa,复合模量从10890 Pa降到6049 Pa,分别降低了39.47%和44.45%。长时间高浓度的氧化条件使得蛋白质的空间结构受到严重影响,WPI的功能性质及凝胶质地发生较大的变化。因此,在实际生产中应尽可能地控制蛋白氧化的发生,减少其因为氧化所带来的营养损失或者降低其应用价值。     

新疆新春36号黑小麦中硒的分布及富硒蛋白提取工艺研究

为了探究新疆新春36号黑小麦中硒的分布,本实验通过单因素及响应面分析法对硒蛋白、硒多糖、硒核酸及不同溶解性的硒蛋白做了系统考察。结果表明:36号黑小麦中硒蛋白、硒多糖及硒核酸中硒的含量分别为(240.52±0.3)、(32.45±0.21)、(4.65±0.05)mg/g;碱溶性、水溶性、醇溶性和盐溶性硒蛋白的含量分别为(146.21±0.3)、(41.52±0.6)、(19.40±0.06)、(13.65±0.12)mg/g。碱溶性硒蛋白的最佳提取条件为:Na OH溶液浓度0.17 mol/L,酸化p H4.7,(NH4)2SO4饱和度为66.0%,料液比为1∶10。该条件下模型预测碱溶性硒蛋白的提取率为76.5593%,实际实验值为76.7%。      

响应面法优化野西瓜种子蛋白质提取工艺

运用响应面分析法优化提取野西瓜种子蛋白质的最佳工艺条件,以蛋白质提取率作为响应值,对温度、pH值、提取时间和液料比进行中心组合设计。试验得出的二次模型的相关系数R2 = 96.7%。蛋白质的提取率主要受溶液的pH和液料比的影响。经过响应面分析得出野西瓜种子中蛋白质提取最佳条件为液料比23∶1（mL:g）,提取时间50 min,pH值8.40和温度45 ℃,该条件下经模型预测得到的蛋白质提取率为17.63%,实际实验值为（17.19±0.09）%。