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目的:探究宁夏枸杞多糖对转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)诱导的心脏纤维化细胞模型干预作用。方法:分离培养小鼠原代心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs),用质量浓度10 ng/mL TGF-β1作用于CFs,建立心脏纤维化细胞模型,采用宁夏枸杞多糖进行处理,观察细胞形态;免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达水平;Western blot检测TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达及其磷酸化水平;实时荧光定量聚合酶链式反应检测Snail、Twist和S100A4 mRNA的表达水平。结果:与对照组相比,模型组加入TGF-β1后,CFs细胞的形态由梭形变得狭长,细胞数目显著增多;α-SMA蛋白相对表达量升高;TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达及其磷酸化水平升高;Snail、Twist和S100A4的mRNA表达水平高度显著升高(P<0.001);给予宁夏枸杞多糖处理,可高度显著抑制TGF-β1诱导的CFs增殖(P<0.001),减少CFs细胞中α-SMA及TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达,高度显著下调Snail、Twist和S100A4的mRNA表达(P<0.001)。结论:枸杞多糖对TGF-β1诱导的CFs纤维化具有改善作用,其作用机制与抑制TGF-β1/Smads信号通路有关。 相似文献
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目的:考察枸杞中分离得到的绿原酸对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)纤维化的干预效果。方法:质量浓度10 ng/mL TGF-β1诱导CFs建立心肌纤维化细胞模型,用不同质量浓度绿原酸处理纤维化细胞,细胞毒性实验(cell counting kit-8,CCK-8)检测绿原酸对CFs增殖的影响;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测纤维化标志蛋白胶原蛋白(collagen,Col)I、Col III和免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)检测Twist1、Acta2、Snail2及纤维化蛋白S100A4等mRNA表达水平;Western blot检测TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白及其磷酸化表达水平。结果:CCK-8检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能抑制细胞异常增殖;ELISA和免疫荧光检测表明,枸杞中分离得到的绿原酸能下调纤维化标志蛋白Col I、Col III和α-SMA的表达;qPCR检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调纤维化转录调控因子Acta2、Twist1、Snail1、Snail2、Smad4及纤维化蛋白S100A4的mRNA表达(P<0.001);Western blot检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达(P<0.001)。结论:在本研究质量浓度范围内,枸杞中分离得到的绿原酸抑制TGF-β1诱导的CFs纤维化过程,其机制可能与TGF-βl/Smads信号通路有关。 相似文献
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