赭曲霉毒素A单克隆抗体的体外制备及其重组抗体的构建研究

目的 实现抗赭曲霉毒素A(ochratoxinA,OTA)单克隆抗体的体外制备及其重组抗体表达载体的构建与瞬时转染表达。方法 以前期获得的OTA杂交瘤细胞株(O16)为研究对象,通过无血清驯化培养的方式开展OTA单克隆抗体的体外制备研究;采用简并引物法获取OTA杂交瘤细胞的单克隆抗体编码基因,在此基础上构建OTA重组全长抗体表达载体以及OTA重、轻链可变区基因片段与人源恒定区片段连接的重组嵌合抗体表达载体,并基于哺乳动物细胞系,开展两种重组抗体的瞬时转染表达研究。结果 通过缓降血清浓度的方式对OTA杂交瘤细胞进行无血清驯化,实现了体外培养制备OTA单克隆抗体;在此基础上测得OTA单克隆抗体的重链和轻链基因序列,并成功构建了OTA重组全长抗体表达载体(pCDNA3.4-OTA-H/L)和重组嵌合抗体表达载体(p FUSE-OTA-H/L),通过共转染实现了两者在哺乳动物细胞系中的瞬时转染表达;经间接酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)确定体外培养制备的OTA抗体、OTA重组全长抗体和嵌合抗体均具备特异性结合抗原的能力,三者的...     

建设工程项目电子档案的归档应用实践

2019年5月底,福建省首个建设工程电子档案成功归档于厦门城建档案馆。该项目在基于海迈电子档案平台的基础上进行电子档案的制作、签批、整理、归档。本文基于该项目的成功归档进行了总结,分别从工程电子文件形成、归档和管理三方面阐述建设工程资料电子化的优势,同时提出在建设工程资料电子化实施过程中存在的难点。针对存在难点本文提出了改进措施,为下一步全面推进建设工程资料全过程无纸化工作做准备。     

H_(12)MDI型端硅烷基聚氨酯预聚物的合成

以H12MDI(4,4′-二环己基甲烷二异氰酸酯)和不同Mr(相对分子质量)的PPG(聚丙二醇醚)为原料、DBTDL(二月桂酸二丁基锡)为催化剂和A1170[双-(γ-三甲氧基硅丙基)胺]为封端剂,合成了SPU(端硅烷基聚氨酯)预聚物。研究结果表明:SPU预聚物的合成包括PU预聚物的合成和封端反应两个阶段;PU(聚氨酯)预聚物的合成反应速率随催化剂用量增加而加快,当催化剂用量约为50 mg/kg、反应温度为80℃和反应时间为4 h时,PU预聚物的合成反应可基本完成;封端反应的最佳温度为70℃,反应3 h后体系—NCO含量可降至0;通过调节R值[即n(—NCO)/n(—OH)]和PPG的Mr,可使SPU预聚物的黏度控制在56.70~229.92 Pa·s范围内。     

基于球面调和函数的环境映射技术

针对三维虚拟场景的光照一致性问题,以提高场景的真实感为目的,研究了一种基于环境映射的光照技术。此方法采用全景辐射度图对场景进行照明,并利用球面调和函数近似估计理想漫反射物体表面的光亮度,同时添加了漫反射阴影交互转移,实现了低频光照环境下漫反射物体捕获软阴影的实时渲染。实验结果表明,算法绘制质量高,具有一定的实用价值。     

湖南省主栽柑橘品质及贮藏性的比较

为综合评价湖南省柑橘主栽品种的果实品质和贮藏性,该文从湖南省不同主产区分别采摘4个主栽柑橘品种‘宫川’温州蜜柑、‘辛女’椪柑、冰糖橙和‘纽荷尔’脐橙,分别贮藏于通风库和冷库中,对果实性状(大小、果形指数、色泽、种子数)、品质[出汁率、可滴定酸(titratable acid,TA)、可溶性固形物(total soluble solids,TSS)、维生素C(vitamin C,V_C)和贮藏性(呼吸强度、发病率和失水率)]进行比较研究。结果表明,贮藏期间,果实TA含量呈下降趋势,果实发病率和失水率随贮藏时间的延长而逐渐上升,TSS和V_C含量有轻微变化。相关性分析表明,TA与发病率和失水率呈负相关。此外,低温更适合‘宫川’和‘辛女’果实的贮藏,但不适合冰糖橙和‘纽荷尔’长时间贮藏。研究结果将有助于4个主要柑橘品种的特性评价,并为柑橘产业提供有益的指导。     

医院办公自动化系统应用研究

介绍医院办公自动化系统的主要功能特点,指出当前系统应用中存在的问题,并提出个人的看法。     

基于哺乳动物细胞系的重组乙酰胆碱酯酶表达载体构建研究

：目的 构建具有不同信号肽、载体骨架元件以及乙酰胆碱酯酶编码基因序列的真核表达载体,为基于哺乳动物细胞系表达重组乙酰胆碱酯酶提供前期研究基础。方法 通过NCBI数据库查询苍蝇头部、电鳗鱼发电器官来源的乙酰胆碱酯酶基因序列(mdAChE和eleelAChE),经密码子优化后,选择Humaninsulin、小鼠重链、Human CD33 3种信号肽序列,将其与合成的上述目的基因连接后分别与pCMV3、pcDNA3.1(+)、pcDNA3.4 3种载体骨架元件进行组合,构建重组乙酰胆碱酯酶的表达载体,随后分别在CHO-S、Expi293F细胞系中进行瞬时转染表达,产物采用镍柱亲和纯化后进行SDS-PAGE与WB分析鉴定。结果 经菌落PCR及DNA测序鉴定,成功构建了4种重组mdAChE酶的表达载体以及3种重组eleelAChE酶的表达载体。SDS-PAGE、western blot的结果表明,基于pcDNA3.1(+)和pcDNA3.4载体骨架元件的重组表达载体可实现重组mdAChE和eleelAChE酶的可溶表达;以pCMV3为载体骨架元件的表达载体,仅在以Human CD33为信号肽时,在CHO-S细胞系中实现重组mdAChE酶的可溶表达,其余情况下均未见有效表达。结论 实现了昆虫、鱼类来源的重组乙酰胆碱酯酶在哺乳动物细胞系的可溶性表达,发现载体骨架元件、信号肽类型对其重组表达具有重要影响,CHO-S以及Expi293F细胞均适合重组乙酰胆碱酯酶的表达,后续还需对影响其酶活、农药敏感性的关键限制性因素开展深入地研究。     

浅谈办公自动化环境中的网络安全设计

现代社会中,网络应用已渗透到社会经济生活的方方面面,在办公自动化环境中,拥有一个安全网络信息系统变的由为重要,本文通过分析办公自动化环境下常见的网络安全问题,提出相应的办公自动化网络安全措施设计。     

影响油藏注入水含油分析的几个问题

对实验室内油藏注入水含油量测定过程中影响含油分析的主要环节进行分析，并采用空白样测定、平行双样测定、加标回收率测定等方法进行质量控制，提高了实验室油藏注入水含油分析质量。     

浅析喀什地区农业高效节水建设中存在的问题及对策

本文对喀什地区农业高效节水工程建设中在前期规划、工程建设、运行管理等方面存在的问题进行了阐述,针对这些问题提出了加速发展农业高效节水建设的对策和措施。