蜡样芽孢杆菌芽孢DNA提取前处理方法比较

蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)是兼性需氧革兰氏阳性菌,为我国常见的食源性致病菌之一。基于PCR技术的快速检测方法在蜡样芽孢杆菌检测中已得到广泛运用,然而该菌在食品中多以芽孢形态存在,常规DNA提取方法难以得到高质量的DNA样本进行PCR反应。本文对鲜牛奶中蜡样芽孢杆菌芽孢进行溶菌酶法、煮沸法、液氮研磨法、超声波振荡法处理,再提取DNA比较PCR检测结果,实验表明,超声波振荡法能够有效的破碎芽孢细胞,提高DNA提取效率,增加PCR检测的灵敏度。     

微滴数字PCR技术在动物源性食品成分鉴定中的应用进展

动物源性食品中的掺假问题是食品加工、流通和餐饮中存在的重要问题。微滴数字PCR(Droplet digital PCR,dd PCR)是绝对定量核酸的一门新的核酸扩增技术,能对动物源性食品成分进行精准定性和定量分析,应用前景广。文章对微滴数字PCR技术的原理、发展、优势以及应用方面进行了综述。     

南京地区猪肉源中沙门氏菌分子分型及耐药性分析

沙门氏菌是造成我国食源性疾病的常见细菌之一,也是肉类消费过程中密切监测的重点对象。在2018年~2021年期间,共计采集了南京市545份猪肉源食品样本,利用选择性培养法分离得到44株沙门氏菌,采用血清学方法和分子生物学方法（MLST）对其进行分型鉴定,并分析其耐药性。结果表明,市售样本中共计检出44株沙门氏菌,平均检出率为8.07%,其中内脏样本检出率相对最高（检出率为30.49%）;血清型分析表明,检出的菌株中以鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）、罗森氏沙门氏菌（Salmonella rissen）、德尔卑沙门氏菌（Salmonella derby）和伦敦沙门氏菌（Salmonella london）4种血清型沙门氏菌最为常见;基因分型表明,ST19型为猪肉源中优势沙门氏菌株,占比为20.45%;检出的沙门氏菌中,38株菌株对四环素具有明显耐药性,占全部检出菌株的86.36%,而对头孢他啶、头孢噻肟和头孢西丁的耐药不超过10%。此外,对检出的1株多重耐药性沙门氏菌耐药基因分析发现,共筛查出了包括7大类抗生素及与耐药相关的基因。该实验详细分析了南京市场猪肉源食品中沙门氏菌污染状况,也为后期沙门氏菌的综合防治提供了理论依据。     

液滴数字PCR定量检测鸭血制品中掺假成分

鸭血制品作为市场常见商品,掺假现象十分严重。选取鸡、鸭、鹅基因组中的特异性单拷贝基因为靶基因,设计引物和探针,建立鸡、鸭、鹅血微滴数字PCR定量检测方法。使用人工混合样品对该方法的准确性进行验证,同时通过检测市售样品来验证方法的适用性。实验结果表明,样品含量在1~1000 μg/mg时,靶基因拷贝数与样品质量之间具有良好的线性关系,检测限和定量限分别为5 μg/mg和1 μg/mg。通过人工混合样品和市售样品检测证明,该方法具有良好的准确性和适用性,可用于对鸡、鸭、鹅血制品的定量检测。