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研究了CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响。对不同代次CHO细胞形态进行观察,并利用中性红比色法、MTT比色法检测同种受试物对不同代次CHO细胞的抑制率是否有显著差异。结果表明:随着细胞代次的升高,细胞的形态、胞浆折光性、边界、排列均发生了改变;同种受试物对CHO细胞的抑制率随细胞代次的升高呈上升趋势;中性红比色法较MTT比色法对细胞的衰老更灵敏。为了提高细胞毒性试验结果的可重复性以及可比性,细胞代次是需要控制的重要因素。 相似文献
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新型在线净化前处理HPLC-MS/MS测定香精香料中的麦角甾醇和麦角甾酮 总被引:1,自引:0,他引:1
建立一种新型的在线净化前处理装置结合高效液相色谱-串联质谱(high performance liquid chromatography-tandem with mass spectrometry,HPLC-MS/MS)法测定香精香料中的麦角甾醇和麦角甾酮。该前处理装置结合基质分散萃取和柱层析对样品进行萃取和净化,之后对样品进行浓缩并利用HPLC-MS/MS分析测定。HPLC-MS/MS方法以甲醇和水为流动相,0.4?mL/min流速条件下梯度洗脱,采用C18色谱柱进行液相色谱分离,大气压正离子方式电离,多重反应监测模式检测,内标法进行定量分析。结果表明,该方法前处理方便且稳定性强,溶剂可回收,净化萃取浓缩为一体;目标物质麦角甾醇和麦角甾酮能在5?min内得到分离检测,在1.5~250?μg/mL范围内具有较好的线性,各待测物的线性相关系数均大于0.999,检出限为0.32~0.35?μg/mL,在不同添加水平条件下,平均回收率为86%~96%,相对标准偏差在3.1%~3.6%之间。本方法能较好地应用于香精香料实际样品中麦角甾醇和麦角甾酮的测定。 相似文献
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以云南特色晒黄烟烟叶为供试样品, 对调制期三个部位烟叶定期取样, 研究叶面可培养细菌的动态变化和多样性。结果表明, 晒黄烟调制期叶面可培养细菌总量呈先升高后降低再略升高的趋势。细菌种群较为丰富, 主要分布在Bacillus 属、Pseudomonas 属、Arthrobacter 属和Exiguobacterium 属等10 个属。Bacillus 属菌株是整个调制期的优势细菌类群, 与烤烟烟叶的优势种群基本一致。 相似文献
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为更客观地评价烟气对人体感官的影响,建立了模拟主流烟气暴露的仿生吸收装置,并以6种酚类物质和烟碱为对象与人实际抽吸卷烟的相关情况进行了对比,比较了烟气仿生吸收液与剑桥滤片对主流烟气中酚类及烟碱的捕集情况及与抽吸舒适性的相关性。结果表明:①通过该装置测定的主流烟气中烟碱及5种酚类化合物的释放量与志愿者口腔唾液中残留量的t检验结果显示,在95%置信概率下,两种方式的测定结果无显著性差异;②测定了8个市售卷烟样品,以酚类化合物为例,相比于剑桥滤片,仿生吸收装置中烟气仿生吸收液内酚类化合物的量仅为剑桥滤片中的0.03%~23.75%,且与人体感官生理反应的相关性更高。因此,该装置能更客观地用于烟气暴露下成分的检测表征,可为卷烟产品烟气分析提供技术支持。 相似文献
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为考察不同细胞系对卷烟主流烟气细胞毒性检测结果的影响,为我国进行烟气毒理学评价选用适合的细胞系提供试验依据,选用中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)、中国仓鼠肺细胞系(CHL)、中国仓鼠肺成纤维细胞系(V79)、人支气管上皮细胞系(BEAS-2B)和人肝癌细胞系(HepG2)共5种细胞系,采用中性红摄入法检测卷烟主流烟气总粒相物和气相物的细胞毒性。结果表明:5种细胞系对卷烟主流烟气总粒相物和气相物的反应敏感程度存在差异,对于烟气总粒相物,BEAS-2B最为敏感,HepG2最不敏感,CHL、V79和CHO产生的IC50差异无统计学意义;对于烟气气相物,CHO和BEAS-2B较为敏感,CHO产生的细胞抑制率与CHL、V79、BEAS-2B和HepG2的差异有统计学意义。综合考虑各细胞系对烟气总粒相物和气相物的敏感程度以及生长培养特点,认为CHO是较为理想的用于评价卷烟主流烟气细胞毒性的细胞系。 相似文献
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建立了一种新型基质固相分散萃取净化技术结合高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLR)测定香精香料中的4种黄曲霉毒素(B1、B2、G1、G2)的方法。该前处理装置结合基质分散萃取和柱层析对样品进行在线萃取、净化和衍生化,之后对样品浓缩并利用LC-FLR分析测定。色谱方法以水(体积分数65%)和乙腈(体积分数35%)为流动相,0.2 mL/min流速下梯度洗脱,采用C_(18)色谱柱进行液相色谱分离,荧光光度法测定(激发波长360 nm,发射波长440 nm)。结果表明,该方法的前处理集净化萃取浓缩和衍生化为一体,操作方便且稳定性强,溶剂可回收;4个目标物质在0.5~120μg/L范围内具有较好的线性,各待测物的线性相关系数均大于0.999,检出限为0.15~0.35μg/L;对实际样品进行不同浓度的添加,平均回收率为76%~93%,日内精密度和日间精密度均5%,结果较为理想。该方法能较好地应用于香精香料实际样品中4种黄曲霉毒素的测定。 相似文献
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